导读

众所周知，USP<231> 重金属章节已经于2018年01月01日正式删除，USP增加了<232>、<233>两个通则用于控制元素杂质。此外还有ICH3D元素杂质也是这方面的指南。

1分析干扰 

2标准及试剂要求 

标准溶液主要用于标化仪器。用于配制样品及标准溶液的所有试剂应不含有元素杂质。可以采用市售的单个元素或多个元素的标准溶液。用于微量分析的标准溶液的有效期是有期限的。一般与浓度、容器的类型、储存条件等都有关系。浓度小于10ppm(W/V)有效期应不得过24小时（来源于USP<730>），除非另有验证数据证明。

检验用水可以用实验室制备的纯化水，浓硝酸、盐酸可以采用市售的专门用于微量元素分析的试剂。

3标准曲线校正 

校正标准溶液

用于校正的标准溶液应每日重新稀释配制。所有校正标准使用50ml聚丙烯离心管，用2% HNO₃ / 1%盐酸溶液稀释至50ml。

校正范围

对于每个目标元素，校准范围至少应该是0.5 J到1.5 J。建议对所有元素进行校准小于0.5 J(即0.1 J和/或0.2 J必要的）。

J：元素限值/稀释倍数；

一般情况下，校正曲线的标准溶液浓度应不得少于2个点，对于分析方法经过验证的限度检测，可以用单点校正法。

4样品溶液的配制 

样品溶液的配制方法由样品本身性质决定，主要有以下四种配制方法：

一、直接法：主要适用于液体类样品及其他无需处理样品

二、直接水溶液：适用于溶于水的样品

三、直接有机溶液：适用于溶于有机溶剂的样品。该方法可能需要使用选择性气体。

四、间接溶液法：适用于不溶于水或有机溶剂的样品。推荐总金属提取得到间接溶液，样品采用密闭容器消化等类似方式。

5样品的消解 

一般情况下，大部分样品可以用HNO3和HCl的混合酸消解完全，但是需要注意安全性问题。

6方法验证 

根据USP<1225>分析方法验证要求，方法可分为类别1（含量），类别2（定量杂质及限度测定），类别4（鉴别）。根据USP<1225>对不同类别的要求进行验证。

准确度：

标准溶液：用标准溶液配制含50%J~150J 目标元素的标准溶液；

样品溶液：在样品消化或溶解之前，加标配制含50%J~150J 目标元素的样品溶液；

接受标准：类别1：平均回收率在95.0~105.0%内。类别2：每个杂质的三份不同浓度的元素回收率均在70%~150%之间；

精密度

重复性：样品溶液：6份样品（相同批次），分别按照限度加入标准元素杂质；

接受标准：类别1：RSD%（N=6）应不得过5.0%。类别2：每种元素杂质的RSD%（N=6）应不得过20%。

中间精密度：由不同的实验员，在不同的天或用不同的仪器，按重复性测定；（应至少包括3个不同因素，例如，1个实验员分不同的3天分别按重复性测定；或者1个实验员分2天采用2套仪器，分别按重复性测定；再或者3个实验员用同一台仪器分别测定）

接受标准：类别1：原料药及制剂含量，RSD%应不得过8.0%；类别2：每种元素杂质的RSD%应不得过25%。

专属性

方法应该能够确保在样本种，每个元素都能被明确的检测出。

定量限

定量限QL=10份空白溶液的标准偏差×10。也可用其他合适的方法确定。

接受标准：应至少能够定量准确分析至限度的50%。

线性

配制的线性溶液的浓度应至少包括2点标准溶液及空白（总共3点），线性浓度应包含需要检测样品的浓度，标准曲线应采用合适的统计学方法，例如最小二聚回归。

接受标准：类别1：相关系数R不小于0.995；

类别2：相关系数R不小于0.99；

范围

范围应包括样品的最高、最低浓度具有精密度、准确性、线性的要求。

接受标准：类别1：居中100.0%浓度的验证范围为80.0%~120.0%；非居中浓度的验证范围为：比下限低10%，比上限高10%。含量均匀度：70.0%~130.0%；类别2：验证范围为70.0%~130.0%；

备注：上述验证指标均来自于USP<730>，药典标准为法定最低标准。

耐用性

通过修改实验参数来得到，应符合中间精密度的要求。

参考资料

USP<232>

USP<233>

USP<1225>

USP<730>

ICH3D元素杂质