1、摘要

本文主要对《国家标准工作手册》第四版中的《国家药品标准物质研制技术要求》一文中的对照品赋值内容讨论，确定合理的对照品标定方法以指导工作实践。

2、概述

在工作的实践中经常碰到无法获得相应的法定对照品，只能使用自制对照品的情况，在这种情况下对照品需要进行标定；众所周知，对照品的一般按照质量平衡法进行赋值，但是对于具体操作细节存在着较大的争议：以使用前不需要干燥的对照品为例，《国家药品标准物质研制技术要求》里规定的计算方法为对照品含量=色谱纯度×（100%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%）；WHO认为计算方法应为对照品含量=100%-有机杂质%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%［1］。本文将对此两种赋值方法进行讨论，以确定工作实践中如何计算对照品含量。以下讨论内容，适用于无法定对照品的自制对照品标定，不适用于工作对照品标定过程。

3、对照品标定方法

上述对照品含量计算方法的争议主要体现在有机杂质是从其他杂质（水分、炽灼残渣、残留溶剂）中独立出来还是与其并列，下文将通过设计一个特殊的模型对上述两种计算方法进行讨论，以下讨论的内容假设检测结果无误差。

1）模型

假设对照品的真实状态为水分、炽灼残渣、残留溶剂的检测结果之和为50%，有机杂质含量为25%，对照品真实含量为25%。

2）对照品含量=色谱纯度×（100%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%）

如有机杂质的计算方法为峰面积归一化法，其杂质含量检测结果应为25%÷（25%+25）=50%，则按照对照品含量=色谱纯度×（100%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%）计算，结果应为50%×（100%-50%）=25%，与真实值一致。

如按照对照品含量=100%-有机杂质%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%计算，结果应为100%-50%-50%=0，与真实值不一致。

3）对照品含量=100%-有机杂质%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%

如有机杂质的计算方法为主成分外标法，其杂质含量检测结果应为25%，如按照对照品含量=色谱纯度×（100%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%）计算，结果应为75%×（100%-50%）=37.5%，与真实值不一致。

如按照对照品含量=100%-有机杂质%-水分%-残留溶剂%-炽灼残渣%计算，结果应为100%-25%-50%=25%，与真实值一致。

4）结论

由上述讨论可知，存在争议的对照品含量计算方法均有适用与不适用的情况，对照品含量计算方法应与有机杂质计算方法相对应，如有机杂质的计算方法为峰面积归一化法，则对照品含量计算方法应遵守《国家药品标准物质研制技术要求》的规定，如有机杂质的计算方法为外标法或主成分外标法，则对照品计算方法按照WHO的要求。

上述特殊模型表明，自身对照法计算的有机杂质含量为100%，不适用于任何一种对照品计算方法，由此可知对照品标定过程中不宜使用自身对照法。关于自身对照法相关内容，详见拙著《自身对照法-无法避免的系统误差》。

4、后述

采用质量平衡法对对照品进行赋值，应当根据有机杂质的计算方法选择适当的对照品含量计算方法。对于含量测定用对照品，由于多数情况下其杂质含量非常少，一般纯度可达99%以上，采用任何一种计算方法的结果相差不大。但是对于杂质对照品，如纯度较低，则应选择适当的计算方法。

相关文献：

1. WHO．Guidelines on submission of documentation for a multi-source （generic）finished pharmaceutical product for the WHO Prequalification of Medicines Programme ：quality part ［EB/OL ］．2012（2015－09－05）．WHO technical report series ，No．943