为保证体外溶出试验数据的准确性和重现性，溶出度仪除了满足《中国药典》、《药物溶出度仪机械验证指导原则》中的规定，还应采用溶出度标准片/颗粒进行性能确认，本文以水杨酸标准片和泼尼松标准片为例，介绍溶出度仪（桨法和篮法）的性能确认试验过程。 

 

溶出度是口服固体制剂一项重点考察内容，在一定程度反映药物在体内的生物利用度。为使同一药品的溶出度测定结果得到良好的重现性，对新安装的溶出度仪应采用溶出度标准片进行性能确认，对当前使用的溶出度仪也应定期（或在出现异常情况时）进行性能确认，溶出度标准片的溶出数据是检定溶出度仪是否良好和实验操作是否规范的依据。 

 

目前为止，供溶出仪校正用的标准片（颗粒）共4种，分别是水杨酸片、泼尼松片、马来酸氯苯那敏缓释片和茶碱缓释颗粒。桨法和篮法用的是泼尼松标准片（崩解型）和水杨酸标准片（非崩解型），即在规定的溶出条件下，测定标准片的溶出量，并与标准片说明书中规定的溶出范围进行比较。 

 

一、R05991批泼尼松标准片（桨法和篮法）的溶出性能确认试验过程

 

1 溶出介质的制备：

 

将高纯水（推荐屈臣氏或怡宝的纯净水）加热至沸腾，持续沸腾10分钟，降温至60~65℃，加双层0.45μm水系微孔滤膜用装有搅拌装置的吸滤瓶中过滤。将吸滤瓶密封并在真空状态（真空度在-0.09～-0.1）下继续保持10分钟。溶出介质的温度在开始实验前不能低于37℃。

 

2 对照品的配制

 

称取泼尼松对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加溶出介质适量溶解并稀释至刻度，再精密量取1ml置100ml量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀。作为对照品溶液。（为了加快对照品的溶解速度，可先用少量乙醇溶解对照品后再用溶出介质稀释定容。但是乙醇的用量应不超过总体积的5%）

 

3 供试品溶液的制备（篮法和桨法）

 

量取溶出介质各500ml，分别置各溶出杯内，注意不要将空气带入溶出介质中，不要搅拌，温度保持在37±0.5℃，调整转速为50转/分钟。用吹风机（冷风）、洗耳球或软刷小心除去片子表面的粉尘，选取泼尼松标准片称重后，分别置于干燥的转篮中（篮法）或同时投入溶出杯中（桨法），30min后，吸取至少10ml溶出样品，并迅速在0.45μm过滤，取续滤液为供试品溶液。

 

3.1 单阶实验

 

3.1.1 每个溶出杯放入一粒标准片按上述方法制备供试品溶液，计算每片的溶出度，先将各个溶出度数据计算到自然对数，再以对数为数据计算平均值1和方差1，对于配置12个溶出杯或14个溶出杯的溶出度仪，不再进行后续实验。

 

3.1.2 对于配置不到12个溶出杯的溶出度仪，可重复3.1.1操作，即再次向每个溶出杯放入一粒标准片按上述方法制备供试品溶液，计算每片的溶出度，将各个溶出度数据计算到自然对数，再以对数为数据计算平均值2和方差2。

 

3.1.3 将3.1.1和3.1.2中的两个平均值和方差分别计算各自的平均值，即

 

 

对于配置12个溶出杯或14个溶出杯的溶出度仪：平均值=平均值1，方差=方差1

 

3.1.4 将3.1.3中的平均值和方差带入计算公式计算GM值和CV值，与限度表中“单阶段”项下标准比较，GM值不得低于范围下限，CV值应高于限度标准，两者均符合，性能确认通过。

 

3.2 双阶实验

 

对于配置不到12个溶出杯的溶出度仪，可以选择双阶实验，双阶实验是一个允许第一阶段实验结果不合格情况下进行第二阶段实验的有效统计方法。

 

3.2.1 每个溶出杯放入一粒标准片按上述方法制备供试品溶液，计算每片的溶出度，先将各个溶出度数据计算到自然对数，再以对数为数据计算平均值1和方差1。

 

3.2.2 将3.2.1中的平均值1和方差1带入计算公式计算GM值和CV值，与限度表中“第一阶段”项下标准比较，GM值不得低于范围下限，CV值应高于限度标准，两者均符合，性能确认通过。否则，进行3.2.3操作。

 

3.2.3 每个溶出杯放入一粒标准片按上述方法制备供试品溶液，计算每片的溶出度，先将各个溶出度数据计算到自然对数，再以对数为数据计算平均值2和方差2。

 

3.2.4 将3.2.1和3.2.3中的两个平均值和方差分别计算各自的平均值，即

 

 

3.2.5 将3.2.4中的平均值和方差带入计算公式计算GM值和CV值，与限度表中“第二阶段”项下标准比较，GM值不得低于范围下限，CV值应高于限度标准，两者均符合，性能确认通过。

 

4 测定法

 

取供试品溶液及对照品溶液，照紫外可见分光光度法，在242nm波长下，采用1cm吸收池进行测定吸光度，按计算公式计算每片的溶出量。

 

5 计算公式

 

 

6 数据的处理

 

计算每片的溶出量，所测片数的GM值和CV值。

 

7 实验要求

 

 

注：单阶段标准适用于杯数配置在8杯以上（大于8）的机器，配置8杯的结果适用二阶段的标准

 

双阶实验中：第一阶段实验计算结果中CV值等于或大于标准上限时，实验终止，判定不合格，需再对仪器、检测方法等检查调整后，重新开始实验，CV值等于或大于标准上限如下：

 

 

8 结论

 

以现行有效的泼尼松标准片批号对应的标准为准，判断溶出度仪性能确认试验是否通过。（在USP中网站下载相应批号的证书） 

 

因泼尼松标准片对仪器和水质要求比较高，故国内一般采用水杨酸标准片对溶出仪进行性能确认。 

 

二、100103-201512批水杨酸标准片（桨法和篮法）的溶出性能确认试验过程

 

1 溶出介质的制备

 

取磷酸二氢钾6.80g，加氢氧化钠1.58g，用水稀释至1000ml，即得磷酸盐缓冲液（pH＝7.4±0.05）。将配制好的磷酸盐缓冲液加热至约45℃，趁热减压用0.45μm滤膜过滤。减压并电磁搅拌5分钟（最大体积4000ml），即得。

 

或取磷酸二氢钾6.80g，加氢氧化钠1.58g，先用尽量少的水溶解（约50ml），加煮沸后冷却至约41℃的水稀释至1000ml，即得。

 

也可采用其他等效的脱气方法，溶出介质中的溶解氧应不超过2.8mg/L。

 

2 对照品溶液的制备

 

取水杨酸对照品约20mg，精密称定，置250ml量瓶中，加溶出介质适量，使水杨酸溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。（为了加快水杨酸的溶解速度，也可先用少量乙醇溶解后再用溶出介质稀释至刻度。但是乙醇的用量应不超过总体积的1%。）

 

3 供试品溶液的制备

 

3.1 方法一

 

量取溶出介质各900ml，分别置各溶出杯内，注意不要将空气带入溶出介质中不要搅拌，温度平衡后，保持在37±0.5℃，调整转速为100转/分钟。用吹风机（冷风）、洗耳球或软刷小心除去片子表面的粉尘，选取水杨酸标准片称重后，分别置于干燥的转篮中（篮法）或同时投入个溶出杯中（桨法），自水杨酸片接触溶出介质时开始计时，经30分钟时取样（误差应不超过20 秒），用不大于0.8μm孔径的滤膜滤过，取续滤液为供试品溶液。自取样至过滤应在30秒内完成。

 

3.2方法二

 

桨法也可以每片间隔30秒，逐片置于溶出介质中。自第一片溶出度标准片接触溶出介质时开搅拌桨，从第二片开始，在投放过程中注意避免与桨杆或桨叶发生碰撞，且溶出度标准片在溶出杯中的位置应处于溶出杯底部的中心位置。如有差异，溶出度标准片距溶出杯底部中心的距离不超过1cm。以各溶出度标准片接触溶出介质开始计时，取样时间也相应间隔30秒。其余操作同方法一。

 

4 测定法

 

4.1取供试品溶液及对照品溶液，照紫外可见分光光度法，采用0.3cm吸收池,在296nm的波长处测定吸光度，按计算公式计算每片各时间点的溶出量。

 

4.2也可精密量取供试品溶液和对照品溶液适量，定量稀释5 倍后采用1cm吸收池测定。

 

5 计算公式

 

 

 

6 数据的处理

 

计算各水杨酸片的溶出量及相对标准偏差（RSD）。

 

7 实验要求

 

7.1 30分钟各杯溶出量的相对标准偏差（RSD），篮法应不得过5%；桨法应不得过7%；

 

7.2 30分钟时每片的溶出量均应在规定的范围内

 

 

8 结论

 

以现行有效的水杨酸标准片批号对应的标准为准，判断溶出度仪性能确认试验是否通过。（在中检院网站下载相应批号的国家药品标准物质使用说明书） 

 

溶出度方法的标准化过程中，校正用标准片的引入是非常重要的，为规定和控制当时溶出度方法中的变异因素提供了依据。比如介质中溶解的气体、振动等因素的影响只有在试验过程中才能考察。采用校正用标准片定期检查溶出仪，可以检测操作中的偏离或者某种渐进的漂移，在符合GMP( 药品生产质量管理规范) 的实验室，这是一种必须的常规操作。比如溶出仪移动到新的实验室并且进行安装就需要重新校正仪器。校正用标准片不仅提供了试验条件的监测手段，还能对分析技术的可靠性进行评价。 

 

参考文献：

1.  中国药典

2.  药物溶出度仪机械验证指导原则

3.  国内外溶出度试验用标准片的研究及应用

4.  水杨酸标准片说明书（批号：100103-201512）

5.  USP泼尼松标准片证书（批号：R05991）