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液相分析方法验证的统计原理-耐用性

嘉峪检测网        2021-12-13 00:04

这次来说一个可以用统计玩花活的地方——耐用性

 

耐用性是什么?

 

耐用性是衡量色谱条件忍受微小变异的能力。在分析过程中,误差的存在会引起测试结果的改变,而我们不希望测试结果随着误差发生剧烈的改变。因此耐用性可以带来两个好处,一是控制并降低成本,二是使测试结果具有较高的可信度。

 

耐用性怎么表示?

 

色谱结果是一个多维度的表征,这种多维度的表征往往会带来维度的灾难,即我们难以判断哪些维度是关键特征。于是我们在多维度的时候将各维度权重均设置为一,以期符合所有的目标,但是这样往往造成关键指标不突出,而无法得到最优的结果。 

 

耐用性的考察是一种稳健性的测试,首先应该抽提出一个参数来表征,这个参数应该具有足够的灵敏度并且与色谱条件相关,与操作误差无关。大部分时候我们将之设置为系统适应性测试。

 

耐用性考察示例——基于DOE的耐用性验证方案

 

1. 实验设计如下:

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

在上表中通过五个变量设置了色谱条件的波动范围,分别是柱温、有机相比例、流速、pH及色谱柱。为了简化步骤,此处仅仅保留两个分离度及杂质A、B相对于初始条件峰面积的百分比。其余色谱参数此处省略。

 

2. 具体操作(软件采用JMP)

 

Step1.首先录入数据:进入JMP→分析→筛选

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

Step2.分别选入自变量和因变量

 

其中分离度和Rs-AB受到色谱条件的影响,色谱条件对杂质A、B无显著性的影响,杂质A、B之间的差异可能是系统误差(积分,进样等等)

 

Step3.分别建模

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

选择构建模型→选择相关变量

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

点击运行,结果如下:

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

杠杆图

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

该图说明pH,柱温均对分离效果有促进作用,而流速有抑制作用。不同色谱柱之间存在差异。

 

Step4.作图

 

将所有的变量均按照该思路进行计算,仅保留与色谱条件有关的变量,最后剩下Rs-BM以及Rs-AB。然后进行合并矩阵:

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

得到矩阵如下:

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

对系数作图:

 

液相分析方法验证的统计原理-耐用性

 

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来源:色谱技术交流