1  概念区分    

     溶剂峰，顾名思义就是溶解样品溶剂出的峰。如样品用甲醇溶解，单独进甲醇溶剂的峰即是溶剂峰。

    空白峰和溶剂峰这两个概念经常被分析工作者混淆，但严格来说，空白峰指的是样品基质本底的出峰情况（即空白基质样品），并不仅仅指溶剂峰。若是简单的小分子极性化合物，溶剂峰和空白峰在谱图上通常无较大区别；而若是蛋白、食品等基质本底干扰不可忽略的样品，空白峰往往比溶剂峰要复杂。

   鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。

    在实际分析工作中，经常被空白峰、溶剂峰及鬼峰让人无所适从，如不了解他们之间的区别及产生的原因，会让你很头疼。针对上述情况，本文简单的进行了梳理，仅供大家交流与参考。

2  溶剂空白&空针

    既然讲到了空白峰，那就不得不多说一句。我们在进行常见色谱峰异常问题排查的过程中，经常需要寻找异常峰的来源，这时就经常要进行两个步骤：

（1） 进空针；（2）进溶剂空白

    这两步的概念千万不可混淆。进溶剂空白很好理解，指进空白溶剂；进空针指的是仪器空运行一针，相当于运行一针流动相，不是指进空白溶剂，也不是指拿下色谱柱接两通进样。

    若色谱运行过程中出现异常峰，建议大家按照先进空针，再进溶剂空白的顺序排查。若进空针无异常，进溶剂空白也无异常，说明异常峰来源于样品本身（基质本底）；若进空针无异常，进溶剂空白有异常，说明异常峰来源于溶剂空白；若进空针有异常，说明异常峰来源于系统污染（包括仪器、管路、进样系统、流动相），或色谱柱污染。

3  产生溶剂峰案例

      对于高效液相色谱分析样品的溶解与流动相的选择至关重要，除了遵循一般的流动相的选择之外，我们应该还要注意：用流动相稀释样品而不用吸光度比流动相强的溶剂稀释。大家仔细查看下面的HPLC色谱，实际工作中是否遇到过，能否从中发现一些问题呢？

  上图反映了以下几个问题：1：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的高度不同。原因：在波长相同的情况下，甲醇的吸光强度比乙腈的吸光强度大，因而，在以甲醇做流动相时，检出峰的高度比乙腈做流动相时变低。2：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的保留时间不同。原因：甲醇的极性比乙腈大，在反相色谱分析中，极性越小洗脱能力越强，样品出峰时间越短，因而，在以乙腈做流动相时，检出峰的保留时间比甲醇做流动相时小。3：吸光度大的的溶剂（甲醇）稀释样品，在吸光度小的流动相（乙腈）中，溶剂峰显示更突出（图二）。原因：甲醇的吸光度比乙腈大。极性大小：甲醇 >乙腈

4、水峰&倒峰

     要知道，在液相色谱中，水出峰通常是作为溶剂出峰，因此在出峰的时间上通常都是位于溶剂峰的位置（0~5min之间）。峰形上，相比于其他有机溶剂的溶剂峰，水峰多表现为明显的基线波动，甚至为倒峰；

     而色谱分析中的倒峰则不仅仅局限于水溶剂峰，因此倒峰可能在色谱分析的任何位置出峰。这种情况下，引起倒峰的原因多为在此波长下有造成负吸收的杂质通过检测器，或更有甚者，检测器的电极接反了。出现倒峰的原因很多，总结以下原因，仅供大家在分析工作中参考。

(1)色谱柱故障

(2)用示差折光检测器检测时，样品的折光指数小于流动相溶剂的折光指数

(3)使用的流动相不纯净

(4)进样故障

(5)用UV检测器时，溶解样品所用的溶剂与流动相溶剂不能互溶或两溶剂PH值不同。当溶剂流过检测池时，光在两种互不溶溶的界面上产生折射，从而使光电池接受到不同强度的光，光强度减弱，以至于低于参比，也可出负峰。

排除方法：

(1)检查、更换色谱柱

(2)若要得到正峰，可改变检测器或记录仪的极性

(3)使用纯净的流动相

(4)使用进样阀，确认在进样期间样品环中没有气泡

(5)应尽量采用能与流动相溶剂互溶的溶剂来溶解样品，最好用流动相作为样品溶剂。

5  鬼峰&干扰峰

      鬼峰(Ghost peak)：是对未知来源的色谱峰的统称。色谱分离过程中，特别是在梯度洗脱或者仪器使用时间过久容易产生时有时无的色谱峰，因此鬼峰大的特点就是“飘忽不定”，“神出鬼没”，这种特性通常体现在保留时间不稳定和峰面积不稳定上。鬼峰的来源有很多，但流动相梯度变化产生的鬼峰是棘手，也最常见的。鬼峰可能产生的原因及解决方法见下表。

      而干扰峰因为已经知道是来源于污染物的干扰，因此干扰峰与鬼峰大的区别就是干扰峰往往出峰时间较为固定（有时候峰面积甚至都没太大变化）。因此面对干扰峰，我们就从色谱柱污染、样品污染、试剂污染、流动相污染这几个方面来排查就好了。