皮肤的完整性对于体外皮肤渗透性研究的结果有较大的影响，同时也会产生数据的变异性。本文从法规要求、皮肤完整测试方法和各方法的优劣等进行如下阐述：

法规要求

       皮肤完整性测试试验，除了目视检查外，建议在每个实验中至少还需要进行以下完整性测试的一种或者两种，再将皮肤安装在 Franz 扩散池上。根据文献报道常用的皮肤完整性测试方法有：

(1)TWP(Tritiated Water Method) 氚水方法

(2)Transepidermal Electrical Resistance Method(TEER)经皮电阻方法

(3)Transepidermal Water Loss Method（TEWL）经皮失水方法

       氘水方法：为了确定氚化标记水的吸收特性，将受体隔室充满生理盐水。将无限剂量的氘代无施加到皮肤表面。在不同的时间点（0.5、1、2、3、4 和 5 小时）收集受体溶液，并测定氘代物，计算渗透常数 (Kp)，通过渗透常数判断皮肤的完整性。

      经皮电阻方法：皮肤的电阻抗性，用电阻值KΩ表示，采用惠斯登电桥记录皮肤对离子的通透性，这是一种简单稳定的评价皮肤屏障功能的方法。比如试验用皮肤来自于经安乐处死的28日到30日龄的大鼠，根据皮肤角质层缺失的程度以及皮肤屏障功能的减少（TER低于阈值）的情况来鉴定皮肤是否破损。

      经皮失水方法：经皮失水又称为透皮失水，表明真皮深层的水分通过表皮的蒸发散失，是描述皮肤完整性的重要参数，其与皮肤角质层含水量密切相关，TEWL值越高，表明皮肤散失水分越多，角质层的屏障功能越差。经表皮失水 (TEWL) 被广泛用于评估皮肤的屏障功能。TEWL 定义为单位时间内通过角质层扩散到每个皮肤表面的水蒸气量，用g·m-2·h-1表示。

几种方法的优势劣势

       氘水方法有几个限制。首先，如果测试化合物是氚标记的，则该方法不能应用。其次，水通量会使角质层水合，这对于进行一些化合物的渗透研究来说可能是不希望的状态。此外，氚水通量测定非常耗时，而使用放射性标记物质需要适当的监管批准。

       经皮电阻测得的电阻取决于设备，即应用频率、产生的电流、溶液的离子强度以皮肤样品的表面积以kΩ为测量单位，很难与各种现有的文献报道数值相关联。常规的经验是确定电阻值小于基线（无皮肤膜溶液）三倍的皮肤切片，其屏障已经损坏建议拒绝使用，或者电阻度数高于基线20倍。其具有角质化上皮细胞，也建议拒绝使用。

       经皮失水方法有很多文献来源的数值限度依据，常规更容易测定而更受企业研发人员的认可。TEWL 是液态水通过 SC/屏障扩散的通量。TEWL 仪器测量邻近空气中的水蒸气通量。具体原理如下图：

参考文献：

（1）  GB∕T 27828-2011_化学品 体外皮肤腐蚀 经皮电阻试验方法

（2）  Arch Dermatol Res （1987）279：351-356

（3）  Toxicology in Vitro 23（2009）1429-1435

（4）  Toxicology in Vitro 29 (2015) 113–123