Q：我有点看不懂我的进样器，0.5mL/min的进样面积比1mL/min多一倍，而且每次都这样，这是怎么回事？
A：你这结论怎么来的？
Q：是这样的，我在进样表里设置了近5ul。分别在0.5mL/min和1mL/min进样，检测器是紫外检测器。在0.5mL/min流速下得到的峰面积是1ml/min的2倍。
A：OK，我知道了。事情是这样的，你的进样器是好的，但是峰面积的积分是与流速有关的。我来解释一下。
几乎所有的HPLC检测器都是每隔一个时间间隔来采集流通池的样品数量，然后输出信号。由于流通池的体积固定，相当于是检测流通池内的平均浓度。举个经典的例子，就是紫外吸收检测器。如果将样品置于对浓度非常敏感的检测器检测池中，信号将会是恒定的，至少在一段合理的时间内是这样。
峰面积是将一段时间内的信号积分得到。这就意味着如果样品在检测器内待的时间翻倍，那么峰面积也会翻倍。这就是你碰到的情况。
公式是这样的，峰面积A等于信号S乘以时间t：
A=S*t （1）
信号S与样品浓度c成正比例：
S=p*c （2）
A=p*c*t （3）
浓度等于质量除以体积V：
A=p*t*m/V (4)
最后，体积除以时间得到的就是流速F：
A=p*m*1/F （5）
我们可以看到，峰面积与流速成正比例，这就是为什么当你流速降低一半的时候峰面积增加了一倍。
Q：OK，我知道了。你说这是在浓度敏感的检测器中检测的，什么意思啊？不是所有的检测器都对浓度敏感吗？
A：不，不是所有的检测器都对浓度敏感的。在我们上面讨论的例子中，信号始终保持一致，即使改变流速也一样。所有经典的LC检测器都是这类：光学的如紫外检测器，紫外分光检测器，或者光电二极管检测器，荧光检测器，折光检测器，或者测量绝缘常数的检测器，或者在离子色谱中的电导检测器等等。另外一些很少用的检测器也在这个范畴内，如旋光检测器。
一个简单的测试可用知道你的检测器是不是浓度敏感型的：进样等样品到达检测器的时候，停止流速，看看信号是不是恒定的，如果是的，就说明你的检测器是浓度敏感型的。
Q：我曾经用过放射性检测器，发现如果流速停止了，检测器的输出信号会一直增加。这个是不是与你前面说的浓度敏感型的检测器不一样啊？
A：不是，这个也是浓度敏感型的。它计算的是流通池内的同位素原子的数目。一个容易弄混的地方是，检测器输出的是总的数目，是随着时间累加的。检测器给出的是整体的数目。在低流速下同一个峰计算出来的信号会比较大，因此灵敏度变高。你可以通过停流速观测信号来优化你的分析。
柱后衍生化的检测液比较复杂。实际用的也是浓度敏感型的如紫外吸收检测器或是荧光检测器。但是，只有在非常快速的反应中，反应才会到终点。大多数时候反应都是不完全的。这时就要靠降低流速来增加反应时间，从而提高产量，提高分析精度。
电化学检测器如安培检测器或库伦检测器是个有趣的例子。对于安培检测器，其检测的物质是没有完全电解的，只消耗了1%-10%，因此，安培检测器也是作为浓度敏感型检测器工作的。对于库伦检测器，所有的分析物都在检测过程中消耗掉了。因此，整个信号的总和与流速是无关的。这与我们上面讨论的UV检测器是不同的。所以库伦检测器是一种质量比例检测器。
质量比例检测器的特点是它的信号与时间无关，记住这点。举个例子，前段时间报道了一个简单的液相质量比例检测器。柱子中的流出物都被收集到一个天平里，把溶剂蒸发，然后称重。这虽然很有趣，但不是太实用。然而，它还是说明了质量比例检测器的工作原理。不管你流速快或慢，天平给的数据都是一样的。
另外一些GC检测器也是质量比例检测器，如FID，会完全破坏分析物的分子结构。FID可以通过一些特制的连接装置如传送带或传送线等来连接到LC上。但是在LC中使用GC检测器还是比较少见的。
今天，质谱与液相的连接使用时很常见的了。质谱到底是质量比例检测器还是浓度比例检测器与其连接装置有关。如果是电喷射接口，检测器就是作为浓度敏感型检测器使用的。有的人可能想如果流速提高了，每秒种到达检测器的离子就多了，那么检测的样品也变多了。实际上不是这样的，由于离子化的溶剂分子也会以更快的速度竞争进入接口。如果没有持续的注射质量标准品，质谱的定量就不准确了。
我希望这次关于检测器的简单介绍能够使你理解定量的概念。对于色谱使用者最重要的是要记住大部分LC检测器是浓度敏感型的检测器，其输出的总信号与流速有关。
