核磁中我们会发现烯醇式出两处峰，以此类推烯醇式也出两处峰。那么定量核磁在计算的时候如何处理呢？
1、OOS调查：定量核磁含量偏低
问题描述：A分析员在复核A项目定量核磁含量检验记录时，发现定量核磁结果为95.1%，不符合规定，标准规定NLT98.0%，故展开OOS调查。
人员排查：所有相关人员已通过核磁检测资质，且非首次操作，具备对A项目进行检测的资质，通过口头交流，未发现人为差错。
仪器排查：经过确认涉及到的仪器（核磁和天平无误）。
试剂排查：稀释剂氘代氯仿，内标1,3,5-三甲氧基苯两种试剂经过核对名称、批号、有效期、厂家等信息均和原始记录一致无误。
样品排查：样品储存条件适宜，标识清晰完整。
检验方法排查：分析员使用的方法仪器上的设置与技术包参数一致，检验原始记录书写准确无误，未发现检测方法相关的问题。
检验环境排查：检验温湿度符合房间控制要求，溶液配制及序列运行过程未发现异常情况，仪器周围未发生仪器维修和施工等引起噪音的工作，未发现检验环境异常。
OOS第一阶段调查结论：经以上调查确认，未发现实验室明显差错。
2、深入调查：结果偏低原因剖析
对比原来放行合格两批的样品我们发现，合格的两个批次在化学位移2.5ppm也有相同类似的峰形，应为同一杂质，不合格的这批明显偏大。
根据产品结构式和合成路线，以及理论知识，能确定产品本身以两种结构形式存在。
结合核磁图谱，可确定化学位移2.8pmm为主结构的特征峰，化学位移2.5pmm为主结构烯醇式的特征峰，故应使用化学位移2.8pmm和2.5pmm两处峰面积之和计算主成分含量更合理，如果只积分一种形态的会导致含量偏低。
3、CAPA：解决方案
调查结论：结构互变导致主结构形态减少从而使得定量核磁结果偏低。
解决方案：主结构和烯醇式两个加和计算含量。
CAPA:
1.升版A项目工艺技术包，写明最终产品是以两种结构式存在的，说明两种形态不影响后续产品质量。
2. 升版A项目的定量核磁方法，样品中需要积分的化学位移由“2.8”改为“2.8 and 2.5”，使用两处化学位移峰面积之和计算含量。
3.不合格批按升版后的方法，重新处理核磁图谱并计算含量，出具COA。
总结：实战经验分享
当我们在开发分析方法的时候，要仔细观察结构并结合工艺条件评估是否会产生烯醇式。仔细观察核磁图谱中是否有类似峰也能发现是否有此种结构互变的。一般烯醇式的产生有如下两种机理，当我们分析人员无法判断的时候可以和合成人员共同探讨务必确保结果准确性。
当有机分子中的一个羟基和氢离子(H+)反应时，羟基中的H离子与羟基中的OH离子分离，形成了水(H2O)和一个带有双键和羟基的烯醇分子。这个化学反应被称为酸催化脱水反应。因为在反应中产生的H+离子来自于溶液中的酸，所以这个反应需要一个酸性的环境。在实验室中，经常使用硫酸、盐酸或磷酸等强酸作为反应的催化剂。
另一种产生烯醇的方法是加成反应。加成反应是在化学反应中，两个分子直接发生化学结合，而不是通过某些类型的分解或消除反应发生变化的方法。在这种情况下，烯醇形成是由于双键中的一个碳原子发生了加成反应。
