刺激性依据的标准是10993-10，同样我们建议实验室出具符合GLP的报告，下列内容是需要关注的重点:
(一般用于510(k)申请的报告都为英文，所以为了能让大家在英文报告中找到对应内容，这里我们使用英文相关术语，避免歧义)
1.刺激性测试的类型。主要的实验类型有四种，包括Intracutaneous Irritation Test, Dermal Irritation Test, Ocular Irritation Test, 和Mucosal Irritation Test。或者其它方法。
FDA当前推荐适用Intracutaneous Irritation Test方法。
如果使用Dermal Irritation Test，那需要确保器械接触的人体组织为完整皮肤(intact skin);
如果使用Ocular Irritation Test，那需要确保器械接触的人体组织为眼睛;
如果使用Mucosal Irritation Test，那需要确保器械接触的人体组织为粘膜组织，比如口腔，阴道等);
如果实验使用了其它方法，那么FDA需要提供使用其它方法的详细描述；
2. 实验样品信息。报告中需要包含用于此次实验样品的信息，比如部件名称，材料名称等；注意，需要确保试验样品为产品的最终形态，也就是和产品上市的状态保持一致，不建议提供原材料作为实验样品。
3. Extraction Conditions
a. Test Article Extraction Ratio
样品的浸提比例一般包括，6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick), 0.2 g/ml (elastomers), 0.1 g/ml (non-elastomers). 或者其它比例。
FDA当前推荐使用基于面积来浸提，也就是上述的6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick)。如果实验使用了基于重量来确定浸提比例，则需要给出合理的解释。FDA认为使用重量来代替面积可能会因为不充足的样品量而导致假阴性的结果，所以如果给出解释，那么应该重点解释基于重量确定的浸提比例而得到的样本量应该等于或优于基于面积确定的浸提比例而得到的样本量。
至于如果确定6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 还是1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick)，那么就要根据样本的物理特征了，正如括号中备注的，小于或大于0.5mm厚度，或者带有弹性且大于1mm厚度等条件来决定。
b. Extraction Vehicle
浸提介质一般包括Polar Vehicle (0.9% Sodium chloride), Non-Polar Vehicle (Vegetable, Sesame or Cotton Seed Oil),或者其它。
FDA当前推荐使用极性(Polar Vehicle)和非极性溶剂(Non-Polar Vehicle)分别浸提。也就是上述两种浸提介质都要使用。如果使用其它浸提介质，需要给出合理的解释。
c. Extraction Conditions
浸提条件一般包括37℃ for 24 hr, 37℃ for 72 hr, 50℃ for 72 hr, 70℃ for 24 hr, 121℃ for 1 hr, 或者其它浸提条件。
FDA当前推荐使用50℃ for 72 hr, 或者70℃ for 24 hr。
如果使用37℃ for 24 hr, 或37℃ for 72 hr，则需要给说明器械的临床使用时间是否大于浸提时间。
如果使用121℃ for 1 hr，则需要给说明为什么此浸提温度对产品的浸提物不会有影响。
d. Was the test extract diluted, filtered, or was the pH adjusted?
FDA当前建议在报告中明确包含浸提液状态的描述，此描述应可以清晰的说明浸提液是否在使用前经过稀释，过滤或者调节pH值。
FDA期待的描述中，应该清楚的表明，浸提液在使用前没有经过上述处理。
e. Study Controls
研究对照，FDA建议”Extraction vehicles without test materials only (negative control)”. 如果使用其它的对照方法，则需要给出理由。
f. Extract/Test Article is clear?
FDA当前建议在报告中包含对浸提物质的状态进行描述，浸提介质中的测试样本是否清晰，比如不浑浊，没有颗粒，没有颜色改变，没有膨胀或者降解。
FDA期待的描述中应该如上述所列，没有这些情况出现。
g. Extract Storage Conditions
浸提溶剂的存储条件包括两种Used by 24 hrs post-extraction, 和Stored (>24 hrs)。也就是浸提后的溶剂是否在24小时内使用。
FDA当前建议浸提后的溶剂需要在24小时内使用，否则需要给出合理的解释，并提供使用存储了24小时后的浸提溶剂进行实验对结果没有影响的证据。
一般建议浸提后立即使用。
4. Methods
a. Test System
FDA当前推荐的实验刺激性的实验系统为≥3 Rabbits。
如果不是此实验系统，则需要提供合理的解释,为什么没有使用3只或者更多的兔子。
b. Were intracutaneous injections given along both sides of the spine on the back
FDA当前建议在报告中包含关于是否在动物背部脊柱两侧进行皮内注射的描述，此描述应包括必要的信息，可以让审核员清晰的判断在动物背部进行的皮内注射的方法是否符合下面的要求:
Five 0.2ml doses of polar and five 0.2ml doses of non-polar test extracts on one side and five 0.2 ml doses of polar and five 0.2 ml doses of non-polar control vehicles on the other side.
FDA审核员期望此部分的实验是按照上述要求实施的，如果不是，则需要给出理由。
c. Assessment Times After Treatment
处理后的评价时间，FDA建议为24hr, 48hr 和 72hr.如果使用了其它评价时间，则需要给出合理理由.
d. Was the following then done
FDA当前建议在报告中包含是否完成下列活动的描述.
All erythema and edema grades were totaled separately for each test article and vehicle control, and the total was divided by 15 (3 scoring periods x 5 injection sites) in each animal.
To determine the overall score for each test article and each corresponding vehicle control, the scores of each animal were added, and divided by the total number of animals.
The final test sample score is obtained by subtracting the score of the corresponding vehicle control from the test article score.
FDA审核员期望实验包含上述活动，并在报告中有所描述，如果不是，则需要给出理由。
e. Were there deviations?
FDA当前建议报告中明确结果是否存在偏差，如果存在，则需要提供解释，为什么此偏差不会影响结果的有效性。
5. Results
a. Did animals appear normal, and were there any deaths?
FDA当前建议报告中明确体现实验用动物的状态，是否存在任何死亡情况。
一般来说，实验动物应该外观正常，没有死亡。如果出现不正常的外观或者死亡情况，则需要对这些不良时间进行调查，并根据调查结果评估是否影响实验结果。
b. What was the final test sample score for the polar extract?
FDA当前建议报告中明确描述极性萃取的实验样本的评分，推荐为≤1.0.
如果评分>1.0，那么说明极性萃取不能符合标准要求的接收标准。所以需要提供讨论，论述为什么此结果不会对产品的安全性有负面影响。
c. What was the final test sample score for the non-polar extract?
FDA当前建议报告中明确描述非极性萃取的实验样本的评分，推荐为≤1.0.
如果评分>1.0，那么说明非极性萃取不能符合标准要求的接收标准。所以需要提供讨论，论述为什么此结果不会对产品的安全性有负面影响。
6. Conclusion
Irritation Potential
FDA当前建议报告中明确关于潜在刺激的测试结论，实验结论一般应为non-Irritant.
如果实验结论是Irritant，则需要给出为什么此结论可以被接受。
总结
同细胞毒性和致敏性测试一样，如果提交的刺激性测试报告，包含了上述6条涉及的内容，并且也符合FDA对此项内容的预期，则FDA审核员会很快的结束刺激性的审核；如果报告包含了上述6条涉及的内容，但是其内容不符合FDA的预期，则FDA审核员会花更多时间来审核给出的解释，或要求提供解释。
总之，在提交前，甚至测试前，充分和实验室沟通，确保报告包含这些要素，并且取得符合FDA预期的结果，则刺激性的审核将会以最快的速度完成。
