在口服固体制剂的仿制研发过程中，生物等效性是评价仿制制剂与原研制剂的金标准。溶出曲线作为指导体内外相关性的重要手段，任何参数的改变都会使溶出曲线发生改变，从而影响仿制制剂的生物等效性。通过研究发现，API粒度的改变对其仿制制剂溶出曲线的影响尤为明显，而且粒度检测也是原料药、中间体以及辅料质量标准的关键质量属性。所以如何建立一个有效合理的粒度检测方法，逐渐成为口服固体制剂仿制研发过程中非常重要的环节之一。

对于粒度的检测，2020年版中国药典四部通则0982中也做了详细的介绍，主要分为以下几种检测方法。

其中四部通则0982中第三法光散射法是目前检测粒度最为常用的方法。

那么如何快速的去建立一个API的激光粒度仪检测方法呢？首先我们得先明确以下几个问题。

1、什么是颗粒？

颗粒包括分散在空气或者乳液中的液滴，分散在空气或者液体介质中的固体，以及在液体介质中的气泡。

2、激光粒度仪是通过什么方式来定义并计算API的粒度的？

激光粒度仪是通过等效圆球粒径方式（假设所有颗粒都是球形的）来定义颗粒大小，通过测量颗粒的某种特征，然后以具有相同特征的球体直径来表征颗粒的大小。

3、激光粒度仪的检测原理是什么？

激光粒度仪主要通过不同的粒子所衍射的光落在检测器上的角度来反映；粒子的大小，相同检测器上所叠加的光强度来反映粒子的占比。在检测过程中，所有经过激光束的颗粒都会对光强分布产生贡献，分布在不同角度下的检测器会接收到光强信号，记录下光强的分布，并最终用于粒度分布的计算。

了解了激光粒度仪的原理，接下来，我们来一起学习以下如何快速、准确度去开发和建立一个粒度检测方法。

激光粒度检测方法分为两种，湿法检测和干法检测。湿法检测一般需要考察并确定的参数主要有分散介质、分散时间、分散是否需要超声（超声为外置超声还是内置探头超声）、遮光度以及相应的光学参数（分散介质的折射率、颗粒折射率、颗粒吸收率等）。而干法检测则相对简单，只需要考察确认光学参数和进样速度即可。

对于光学参数的确认。首先是折射率（包括分散介质和颗粒），我们可以通过查找文献、手册或软件中的数据库，折光率仪测量或者使用显微镜——用折光率参比油对照测量等手段获得。常见的几种物质的折光率值范围如下：

橡胶塑料类：1.38~1.57

有机化合物：1.4~1.7

无机盐类：1.52~1.8

金属氧化物：1.6~2.5

再就是颗粒的吸收率，我们主要做了一下统计：

表1颗粒吸收率范围及代表物质

对于其他参数的选择则需要建立在物料的检测方式的基础上，如果是易破碎且非常细小、易分散、样品量充足的样品，适合较为温和的湿法检测，此种方法具有一次进样循环测量且测量结果稳定的优点；如果是样品量较少，且不易分散的样品则适合干法检测，干法检测具有检测速度快，影响检测因素少且无需分散介质的优点。

湿法检测

湿法检测如果出现体系不合适或者不稳定，原因大概有以下几个并举例进行说明。

①样品在分散介质中出现溶解

样品若在分散介质中出现溶解，则湿法检测中遮光率一般会出现持续减小的现象，且检测到大颗粒物质的现象。如图所示：

②样品在检测过程中出现团聚

团聚顾名思义是指小粒径物质在分散介质中抱团，形成“伪”大粒径物质，使检测到的数据偏大或粒径峰鼓包等情况。如图：

③样品在检测过程中被破碎

在粒度检测中，样品被破碎一般是由于超声导致的。样品在分散介质中不能很好的分散或出现团聚现象时，需要增加超声使样品更好的在介质中分散，已达到检测数据相对准确的目的。但若过度超声（如超声时间过长或超声强度过大）则会使样品破碎，导致检测过程中遮光率不稳定或检测数据重复性不好等。而且过度超声产生的热量也会使粒度仪检测光束发生偏转，导致检测误差。典型的粒度曲线如下图：

④样品在检测中超声不完全

超声不完全是指样品在超声状态下，由于超声时间或者超声强度不够，导致样品在分散介质中不能达到很好的分散状态。这种情况下样品在分散介质中会出现分散的不均匀或聚团现象。粒径分布曲线一般会出现多峰或者大粒径检测器较高等现象。如图：

干法检测

干法检测跟湿法相比，影响因素比较简单，除去光学参数，只有进样速度一个考察参数。进样速度一般与样品的流动性和进样压力有关，干法的遮光度一般设置在0.5~6%的较低的范围内，在样品的流动性无法改变的前提下，我们主要通过控制进样压力和进样盘的震动速率来控制进样速度，以保证在进样的过程中，遮光度保持相对稳定。

总结

不管是哪种检测方式，若想要得到高质量的检测结果，在选择正确的光学参数和分析模型的前提下，必须做到好的检测背景和好的样品检测。好的检测背景体现在干净的样品池和分散介质、正确的系统对光以及随时间保持稳定的检测系统；而好的样品检测则需要有足够的样品信噪比、避免负的数据、避免多重散射以及避免激光波动。