【问】通常我们在分析天然药物成分的时候结构复杂，无法考察组分的PKa值，我们如何去选择最合适的流动相或者是拖尾该怎么改善呢？

【答】如果天然产物中没有易电离的极性基团，就不需要用缓冲盐调节pH。如果天然产物中既有酸性基团，也有碱性基团，譬如有pKa=6.2的羧基和pKa=9.0的氨基的两性物质，建议将pH用磷酸盐缓冲盐控制在2.4（如果是诸如月旭的Ultimate LP-C18这样的耐酸色谱柱，还可以调得更低）。如果pH控制在6.2-9.0之间，两个基团都处于离子态，保留能力最差，是最不可取的。如果不清楚复杂物质中含有什么基团，也请将pH调到2.4或更低。因为pH调低，起码抑制了酸性基团的电离而处于中性分子状态，而增加酸性基团这个部分在反相色谱中的保留能力；另外低pH还抑制了硅醇基的活性，有利于获取对称的峰形。情况不明时候，为什么不建议调高pH呢？一方面一般色谱柱都不能承受pH9以上的条件；即使是像月旭的Xtimate系列一样能耐12.5的柱子，调高pH和调低pH相比，还有一个硅醇基活性大的劣势。