代餐食品可替代正常饮食，是一种治疗肥胖的有效策略。与其他治疗方法相比，代餐不仅能有效降低超重、肥胖患者的食欲，控制人体能量密度，还能防止控制饮食过程中必需营养素缺乏等情况，同时代餐食品依从性较好，有助于保持长期减重的效果，甚至改变食用者的饮食行为习惯。随着市场化规模的扩大，代餐食品生产质量上的隐患不断浮现。由于多数代餐食品是通过电商平台和微商平台销售，某些不良商家为达到快速瘦身的效果，在代餐食品中违规添加对人体有害的药物成分，有一定的抑食减肥功效，但是可能对肝脏、肾脏等造成严重损害，甚至危及生命。我国已将西布曲明列入《保健食品中可能非法添加的物资名单 ( 第一批 )》中，明确认定其为会严重损害肝脏、肾脏等器官组织的“有毒、有害的非食品原料”；国内《食品安全法》规定食品中不得添加药物成分；中国营养学会发布的团体标准 T/CNSS 002—2019《代餐食品》规定代餐食品的生产条件应符合国家有关规定，代餐食品中所使用的原料应符合相应的食品标准和规定，禁止使用非食品原料和禁用物质。

    目前，缺乏代餐食品中非法添加药物的检测标准。三重四极杆复合线性离子阱质谱法属于混合型串联质谱法，兼具传统四极杆和线性离子阱的双重功能，可以自由进行转换，不但保留了串联四极杆多反应监测模式的选择性及灵敏度优势，还具有线性离子阱增强子离子的扫描功能，且同批次检测时药物残留少，抗污染能力更强，能有效提高复杂基质中微量化合物的定性定量能力。研究人员结合QuEChERS前处理方法，采用高效液相色谱-三重四极杆复合线性离子阱质谱法测定代餐食品中6种非法添加减肥药物的含量。

1、 试验方法

     取样品于离心管中，加入甲醇，振荡，涡旋提取，用甲醇定容摇匀，然后离心。取上清液于净化管 [含N-丙基乙二胺 (PSA)、十八烷基硅烷键合硅胶（C18）和硫酸镁（MgSO4）]中，涡旋离心。分取适量上清液，过有机滤膜，滤液按照仪器工作条件测定。若样品中待测组分含量较高时，用甲醇稀释至线性范围。

2、 结果与讨论

2.1 质谱条件的优化

     以100μg·L−1单标准溶液为待测对象，通过进样针直接连通质谱（MS only）模式优化质谱条件。利用 SCIEX Triple Quad 软件的化合物开发功能进行MRM-IDA-EPI质谱扫描。设定 MRM检测窗口时间并进行分段时间扫描，以满足色谱峰采集点数；然后进行 IDA 扫描，继而触发 EPI 扫描，富集碎片离子，从而获得高灵敏的全谱信息。先利用一级质谱扫描筛选母离子，ESI+ 模式下得到了 [M+H]+；然后进行二级质谱扫描，选择响应较高的碎片离子为定量离子，次强的碎片离子为定性离子，并对去簇电压和碰撞能量进行优化。优化后的参数如表1所示。

2.2 色谱条件的优化

2.2.1 色谱柱

    选用常规C18色谱柱分离目标组分，试验比较了ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱和 Proshell 120 EC-C18色谱柱对6种待测组分的分离效果。根据结果，试验选择采用 ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱分离6种待测组分。

2.2.2 流动相

     甲醇-水和乙腈-水体系是液相色谱-质谱分析中常用的流动相。在水中适当加入甲酸或乙酸铵，可使待测组分较好地离子化，从而增强色谱峰响应强度和改善色谱峰峰形。试验考察了乙腈-水、乙腈-含5mmoL·L−1乙酸铵的0.1%甲酸溶液、甲醇-水、甲醇-含5mmoL·L−1 乙酸铵的0.1%甲酸溶液等体系对6种待测组分的分离效果。结果显示：以乙腈-水体系为流动相时，不管是否添加甲酸和乙酸铵，待测组分的分离度和响应强度均不理想；以甲醇-含5mmoL·L−1乙酸铵的0.1%甲酸溶液体系为流动相时，相较甲醇-水体系，6种待测组分的分离度和响应强度均较好，这是由于在水中加入低浓度水平甲酸和乙酸铵，能够有效提升待测组分的响应强度和改善待测组分的分离度，同时能消除麻黄碱和酚酞的拖尾现象。因此，试验选择的流动相为甲醇-含5mmoL·L−1乙酸铵的0.1%甲酸溶液体系。在优化的仪器工作条件下，6种组分的总离子流色谱图如图1所示。

2.3 样品前处理条件的优化

2.3.1 提取溶剂

     由于6种组分均易溶于极性有机溶剂，试验分别选择两种常用溶剂甲醇和乙腈提取加标空白代餐饼干中6种待测组分。根据结果，试验选择的提取溶剂为甲醇。

2.3.2 提取方式和提取时间

     以2.3.1节加标样品为待测对象，试验比较了分别以涡旋、超声、均质提取等 3 种常见方式提取1，2，5，10，20min（不同提取时间编号分别为 1#、2#、3#、4#、5#）时代表性目标组分西布曲明的回收率，结果见图2。

    由图2分析可知，试验选择采用涡旋提取方式提取5min。

2.3.3　净化剂总量

    净化过程常用吸附剂有C18、PSA、MgSO4等。其中：C18能较好地吸附非极性杂质和色素等；PSA能较好地除去提取液中糖类、脂肪酸、酚类等酸性成分以及极性色素；MgSO4是常用的除水剂。由于代餐食品基质较为简单，在提取后可选取现成的分散固相萃取净化管净化。以 2.3.1节加标样品为待测对象，比较了C18、PSA和MgSO4的质量比均为1∶1∶6时3种净化剂总量分别为0，200，400，600，800，1200，1 600，2000mg时 种待测组分的回收率，结果如图3所示。

    由图3分析可知，试验选择的吸附剂总量为200mg。

2. 4 基质效应

     基质效应 (ME) 是指分析过程中待测组分的响应会因基质的影响而增强或抑制，可采用阴性样品溶液和溶剂制作的标准曲线斜率的比值（ME值）来评估。如果ME值在0.80~1.20 内，说明基质对待测组分表现出了轻微的减弱或增强效应，基质效应可忽略，直接采用溶剂配制混合标准溶液系列即可；如果ME值大于1.20或小于0.80，说明基质对待测组分表现出了增强或抑制效应，基质效应不能忽略，需要采用阴性样品溶液配制混合标准溶液系列。分别以阴性代餐饼干、代餐粥、代餐奶昔溶液和甲醇配制混合标准溶液系列，按照仪器工作条件测定并制作标准曲线。结果显示，6种待测组分的ME值均在0.91~0.98内，说明基质效应较弱，本方法可直接采用溶剂制作标准曲线。

2. 5 标准曲线、检出限和测定下限

     按照仪器工作条件测定混合标准溶液系列，以各待测组分的质量浓度为横坐标，其对应的峰面积为纵坐标进行线性回归。结果显示，6种待测组分的质量浓度在0.5~20.0μg·L−1内和峰面积呈线性关系，其他线性参数见表2。

    以 3，10倍信噪比（S/N）对应的质量分数为检出限（3S/N）和测定下限（10S/N），结果如表2所示。

2. 6 精密度和回收试验

     按照试验方法对阴性代餐饼干样品进行3个浓度水平的加标回收试验，每个浓度水平平行测定6次，计算回收率和测定值的相对标准偏差（RSD），结果见表3。

    由表3可知，6种待测组分的回收率为79.5%~ 102%，测定值的RSD均小于5.0%，满足样品的定量分析要求。

2. 7 样品分析

    按照试验方法分析线上和线下购买的40批代餐食品，结果显示，3批代餐奶昔样品（标记为阳性样品1#、2#、3#）检出了非法添加药物西布曲明，检 出 量 分 别 为 2.60×107，2.62×107，1.86× 107μg·kg−1，检出情况与其他相关报道一致。食用西布曲明后极可能出现急性症状，建议消费者尽量通过正规渠道购买合格的代餐产品。其中，阳性样品1#的色谱图和EPI质谱图如图4所示。

3、 试验结论

     研究人员采用高效液相色谱-三重四极杆复合线性离子阱质谱法测定代餐食品中6种非法添加减肥药物的含量，可以在5.0min内完成检测，且预处理简便，回收率和精密度好，可为检测机构定性定量分析代餐食品提供技术支撑。

作者：周建峰1，陈建1，张方方1，陈鑫兰1，张碧宇1，胡平平2

单位：1. 温州市质量技术检测科学研究院；

2. 永嘉县食品药品检验中心（县药品不良反应监测中心）

来源：《理化检验-化学分册》2024年第10期