盐酸克伦特罗又称瘦肉精，是一种肾上腺类神经兴奋剂。如果作为饲料添加剂被猪等动物食用后，能促进蛋白质的合成、加速脂肪的转化和分解，从而提高猪肉的瘦肉率。然而，含有“盐酸克伦特罗”的猪肉一旦被人食用，会引发心悸、肌肉颤动、头晕、乏力等急性中毒症状。因此，我国自2002年9月10日起，禁止在饲料和动物饮用水中使用盐酸克伦特罗。

表1  盐酸克伦特罗样品信息

       适用于牛奶、奶粉中盐酸克伦特罗的检测。

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

试剂材料

       市售浓缩牛奶；盐酸克伦特罗标品；Ⅰ级蒸馏水；甲醇（色谱纯）；三氯乙酸、乙酸铅、三氯甲烷、氨水（均为分析纯）。

色谱柱：ZKAT-C18（5 μm，120 Å，4.6×250 mm，订货号：152200542）

SPE柱：AE.SPE-MCX（500 mg/6 mL）

四、样品制备

样品提取

       准确量取2 mL牛奶于50 mL离心管中，加入5 mL三氯乙酸水溶液（10 g/L），充分振荡；加入2 mL乙酸铅水溶液（22 g/L）和2 mL三氯甲烷，充分混合2 min；4000 r/min转速离心5 min，收集上清液；残渣中加入5 mL三氯乙酸水溶液（10 g/L）和2 mL乙酸铅水溶液（22 g/L），重复提取一次，合并提取液待净化。

SPE柱净化

（1）活化：PXC固相萃取柱使用前依次用6 mL甲醇、6 mL水活化。

（2）上样：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以2 mL/min的流速过柱，弃去滤液。

（3）淋洗：用6 mL甲醇、6 mL水淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液。

（4）洗脱：用6 mL 5%氨水甲醇溶液洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液。

（5）重新溶解：洗脱液于45℃氮吹吹干，用流动相定容至1 mL，0.45 μm微孔滤膜过滤，供HPLC测定。

五、添加回收结果

色 谱 柱：ZKAT-C18（250 * 4.6 mm，5 μm）

检 测 器：UV3000型紫外/可见光检测器

检测波长：UV 244 nm

流 动 相：乙腈/磷酸二氢钾水溶液*（v/v=30/70）

流    速：1.0 mL/min

进 样 量：20 μL

*磷酸二氢钾水溶液（10 mmol/L，pH = 3.0）

六、结论

        采用此方法进行奶制品中盐酸克伦特罗含量的液相测试，添加回收率达到100.29%，表明AE.SPE-PXC 及ZKAT-C18适于乳制品中盐酸克伦特罗的纯化和测试。