7月2日，国家药品监督管理局、国家卫生健康委发布公告，正式颁布2020年版《中国药典》，新版药典将于今年12月30日起正式实施。新版《中国药典》中对生物指示剂的耐受性检查方法进行了指导，本文对其要点进行了整理，供大家参考。

生物指示剂的耐受性是指其所含的微生物能够耐受各种灭菌程序的能力。一般来说，生物指示剂的耐受性用D值来表示。D值是指将试验微生物杀灭90%所需的灭菌时间或灭菌剂量。生物指示剂的主要质量参数包括总芽孢数、D值和存活时间、杀灭时间。

总芽孢计数培养基

（1）芽孢计数可用胰酪大豆胨琼脂培养基或其他适宜的培养基。

（2）胰酪大豆胨琼脂培养基照无菌检查法（通则1101）制备，其他培养基照生物指示剂使用说明书进行制备。

（3）芽孢计数用培养基应进行培养基适用性检查。

稀释液

灭菌纯化水（或其他经过验证的无菌溶液）。

芽孢悬液制备

（1）芽孢悬液制备方法如下，如果下列方法经确认不适用，应建立其他适宜的方法。

（2）根据生物指示剂的载体和初级包装情况，采取适宜的制备方法将载体上的细菌芽孢充分洗脱并混悬于稀释液中。

（3）液体芽孢悬液生物指示剂

将芽孢悬液生物指示剂样品充分混匀后，或经过超声处理后，取1ml，用稀释液制成1︰10的供试液。

（4）纸质载体生物指示剂或自含式生物指示剂

取不少于4个最小单位生物指示剂，将纸片载体从初级包装中取出，置适量的稀释液中，采用搅拌、涡旋或其他适当的方式，使容器里的纸片成纤维状（建议至少需要15分钟的浸泡和搅拌以使芽孢能充分回收），充分混合制成均一的混悬液。

（5）非纸质载体的生物指示剂

取不少于4个最小单位的生物指示剂，将载体从初级包装中取出，置适量的稀释液中，可采用超声波（振荡器）反复振摇，或其他适宜的方法将载体上的芽孢充分分散于稀释液中。

热激活处理

取上述制备的芽泡悬液10ml，置灭菌试管中，按照表1的要求进行热激活处理，时间达到后将芽孢悬液转移至0～4℃的冰水浴中迅速冷却至室温。