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嘉峪检测网 2021-09-29 22:38
引言:应急医疗器械多数企业来自服装加工等传统行业,对于微生世界的很多事物很难理解,特别是有关微生物的计算。本文为大家科普微生物检测中的梯度稀释,我尽量用通俗的语言帮大家理解这个过程。
怎么理解微生物检测中的梯度稀释?
我以口罩、防护服微生物检测指标为例说明。
一、介绍梯度稀释之前,先理解几个前提条件:
1.检测结果的单位一般有两种:CFU/g和CUF/件,本文以应用较多的CFU/g为单位讲解;
2.标准状况下(t=4℃),水的密度=1g/cm3=1g/ml ,低浓度的洗脱液我们在实验计算中近似取1g/ml;
3.洗脱液的数量的确定考虑2个方面,一是洗脱液具备洗脱效果(例如至少能够浸泡样品);二是洗脱液的重量+样品的重量是10倍、100倍等10的梯度倍数,便于后续梯度稀释及结果统计。
二、梯度稀释相关计算及说明:
取10g口罩样品,使用90ml洗脱液洗脱,得到100ml溶液(样品稀释倍数为10倍),取1ml洗脱液到培养皿培养中培养,得到Ncfu,计算:N*100/10=10N(CFU/g)。
解释一下:
1. 90ml溶液中包含10g样品,换算成质量即100g溶液中含有10g样品;1ml(即1g)洗脱液中含有的样品重量为0.1g;
2. 实验得出1ml溶液中含有的CFU数量为N,即0.1g样品中含有的CFU数量为N;
3. 我们要求的单位是CFU/g,即每克样品中含有多少CFU,所以,0.1g样品中含有的CFU数量*10即是1g样品含有的CFU数量。本例中即是10N。
从100ml洗脱液中取10ml,加入90ml稀释液二次梯度稀释的计算方法和解释与上述同理。
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