有机合成中经常会遇到微量样品的分离，通常情况下，对于少于100毫克的样品的纯化，有以下几种纯化方法：1、直接高效液相制备色谱(Prep-HPLC)纯化；2、制备薄层色谱(Prep-TLC, 俗称爬大板，爬大板有什么奇技淫巧？)；3、微量样品重结晶（如何重结晶？大量样品和少量样品一样操作吗？）；4、微量柱层析法。微量柱层析法，相对于上述方法，更加经济绿色，而且操作方便，通常十几分钟就可以完成，相对于爬大板，不用浸泡硅胶，避免产生一些不必要的杂质。对于一些极性不是很大的产物，如果产物没有紫外吸收，可以优先考虑此方法。但是没有柱子怎么柱层析呢？实验室中唾手可得的玻璃滴管就可以用于微量柱层析。

第一步：装柱

塞入少量棉花，用木棒压实，不要太紧，只需要防止硅胶漏下就可以。

装入硅胶，在桌面上轻轻地敲一敲，将硅胶压实，上方留4-5cm，用于上样和加洗脱剂。

第二步：润柱

和过大柱子类似，先用滴管在滴管柱上方加入小极性溶剂，通过不断加入溶剂，可以靠重力让柱子润湿。如果嫌慢，直接用乳胶头加压，但是一定要注意，挤压后千万不要松开，压完后拔下乳胶头再松开，否则会把硅胶和溶剂吸起来。当溶剂开始滴下时，完成润柱，但是一定要保持上方的溶剂不要干。

第三步：上样

与平时过大柱子类似，也分为湿法上样和干法上样，具体选哪种要根据样品的性质决定，如果产物极性较大而且溶解度好，可以考虑湿法上样。但是小编建议用干法，因为本来柱子就短，湿法上样会影响部分柱效，会导致分离效果不佳。

第四步：洗脱

根据TLC, 选择合适的溶剂配比【柱层析技术详解】, 不断加入溶剂洗脱，利用乳胶头加压，溶剂液面保持在硅胶上方，不要压干。还是要注意挤压乳胶头后不要松开，拔下再松开。由于柱子很小可以方便的根据分离难度，调节溶剂梯度。

及时更换容器，接收不同洗脱液，由于量很少小编建议用试管接收比较好，通过TLC或者LCMS确定所需产物。

对于纯度要求不高的样品，盲刮Prep-TLC也可以纯化，具体操作和平常的刮大板操作一样，由于产物没有紫外吸收，可以在大板的边上切下来一条。这条板可以通过高锰酸钾，磷钼酸或茚三酮之类的显色剂显板后判断大概位置。然后在剩下的板上画出大概位置刮下来，纯度只能看运气了。如果产物各种显色剂都不显板，则只能分段刮下来通过LCMS或HNMR确认产物点，总之，都很麻烦。

参考资料

科罗拉多大学博尔德分校化学和生物化学系，有机化学实验课。