抑菌效力检测的目的是定性或定量地评估产品的抑菌效力，但是对于不同的产品，适用的检测方法有所不同。目前针对不同的产品各个国家和地区制定了专门的标准，来指导抑菌效力检测的工作。例如：AATCC TM100提供了一种成品纺织材料抑菌级别的定量评价方法；GB/T 21510分别针对纳米粉末，纤维、织物、塑料粉体、微孔滤材等材料，塑料、陶瓷、漆膜、板材和金属等硬质表面材料提供了3种抑菌性能的试验方法；《中国药典》第四部 通则1123提供了成品制剂的抑菌效力检查方法。接下来小编将会伴随大家共同了解一下如何进行产品的抑菌效力检测。

抑菌效力检测的原理

将测试微生物接种至具有抑菌作用的产品上，使产品与测试微生物充分接触，使其发挥抑菌作用。然后对产品上残留的微生物进行计数，计算微生物与抑菌产品接触充分的时间后，微生物的下降百分比及下降对数级，进而评价产品的抑菌效力。

抑菌效力的检测流程

在了解了抑菌效力检测的原理之后，我们来看一下抑菌效力检测的流程：

1. 菌种的选择

依据FDA的要求，应至少使用3种革兰氏阴性菌，3种革兰氏阳性菌，1种霉菌和1种酵母菌进行抑菌效力的评价。不同的标准对于测试菌株有不同的推荐，例如AATCC TM100中推荐的微生物为肺炎克雷伯菌(革兰氏阴性)和金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性)。生产商也可依据产品在临床使用过程中预期接触到的微生物，来选择适宜的菌种。下表是抑菌试验常用的微生物：

2. 模拟使用

模拟使用是将伤口模拟液添加至产品，其目的是为了要模拟产品在临床使用过程中所面临的情况，以评价产品是否能达到其宣称的有效使用时间。例如：某产品可达到持续7天有效抑菌，那我们在进行模拟使用时，时间一般进行7天。

3. 接种

将测试微生物的菌悬液添加至抑菌产品，使其与产品充分接触。“0h”接触时间的样品在接种后立即进行收集，目的是确认收集方法的回收率。“预期”接触时间的样品在接种后孵育预期时间之后再进行收集，通常为24小时，产品发挥抑菌效果所需的时间不同，预期接触时间也可能不同，目的是确认产品与微生物在接触“预期”时间后所剩余的存活菌数。

4. 收集

使用含有中和剂的洗脱介质洗脱产品上的潜在微生物，进行适宜的梯度稀释后过滤培养，并进行菌落计数。中和剂的作用是中和洗脱液中从产品上溶出的抑菌剂，避免在微生物收集和培养过程中抑菌剂持续的发挥抑菌效果，从而对测试结果产生影响。D/E中和肉汤是最常使用的中和剂，也可以依据不同的抑菌剂来选择不同的中和剂。

5. 中和确认

中和确认是使用含中和剂的洗脱介质收集未接种的检测样品，并向其中添加已知量的测试微生物，通过计数回收的菌落数，来评价所使用的中和剂及中和方法是否能起到有效中和的作用。

测试样品的种类

在进行抑菌效力检测时通常会涉及到3类样品：

常规样品：正常效期内的产品，用以评价正常产品的抑菌效果。

老化样品：自然放置或加速老化至使用截止日期的产品，用以评价产品的抑菌性能是否能维持到产品有效期。

阴性对照样品：不含抑菌剂的基质，用以进行收集方法回收率的评价。

接受标准

AATCC TM100和GB/T21510中均未对接受准则进行规定，但FDA要求在“预期”接触时间后，微生物下降对数级达到4，下降百分比达到99.99%。

对于各质控的要求：

未进行接种的样品，收集液应无菌生长；

阴性对照样品接种并孵育“预期”接触时间(24小时)后回收到的菌数与“0h”接触时间回收到的菌数相比应有显著增长。

抑菌试验的注意事项

模拟使用过程所使用的液体应能代表临床使用过程中产品可能会接触到的物质，并制造最糟糕情况。

接种和孵育的过程中需确保微生物与产品充分接触，避免菌液溢出样品，接触不充分而导致测试失败。

阴性对照样品应使用与常规样品/老化样品类型和结构相同，但不含有抑菌剂的材料。

测试前不应对待测产品进行二次灭菌，如果进行了灭菌，需要注明灭菌方法和理由。