Q 74：灭菌柜的控制探头坏了，更换探头后完成了校准，需要做验证吗？

 

解答：

如果更换的探头与之前的相同是不需要重新做验证的，更换后做环路校准就可以。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 73：灭菌柜性能确认有顺序吗，先空载，再最小负载再最大负载，最小穿透，最大穿透？

 

解答：

先进行空载测试，目的是为了确认灭菌室内的温度均匀性和灭菌介质的稳定性，测定灭菌腔内不同位置的温差状况，确定可能存在的冷点。然后在进行负载热分布和热穿透测试，一般情况下负载热分布和热穿透是同时进行的。如果有多个装载形式的话，负载测试时没有特殊的顺序要求。

理由：

N/A

参考：

N/A

Q 72：干热灭菌验证过程中，有时干热线发生短路，为什么？（K型热电偶）

 

解答：

干热灭菌温度比较高，探头又是活动使用，如果使用非专用探头做验证，可能绝缘层会因老化和活动而脱落，造成短路。2.另一种情况是静电问题，建议每次测试完，用布擦一下，会好一些。热电偶产生的温差电动势是毫伏级的，当静电值叠加到探头里会造成短暂的短路。干燥是产生静电的条件，这也是为什么有时会发生在干热灭菌过程中，而在湿热过程中没有这种情况，“有时”表明并不是永久性短路。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 71：湿热灭菌验证F0值的累计是否应该包含升温和降温段？

 

解答：

湿热灭菌验证F0的累积旨在统计灭菌程序获取的物理杀灭时间，即灭菌率的积分值，很小的温度变化会对灭菌率产生明显的影响，进而对F0的统计产生影响。如液体程序，升温及降温时间较长，整个灭菌程序结束时所获得的F0值可能出现远大于灭菌段的F0值，如装载物耐热性较差，只统计灭菌段的F0值可能导致装载的降解或变质，所以验证应考虑整个灭菌过程的F0值。对于采用过渡杀灭法进行灭菌的耐热固体装载，升降温速度较快，升降温阶段的累积F0值较小，可以只统计灭菌段的F0值。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 70：湿热灭菌验证仪器探头必须监控疏水口温度吗？

 

解答：

湿热灭菌柜疏水口有温度探头，湿热灭菌时考察离疏水口探头附近位置即可，原则上反应腔体里面的冷点位置灭菌情况。也可以理解离疏水口位置最近装载物品的灭菌情况。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 69：无菌内衣变更样式，需要进行灭菌柜的验证么？？装载方式不变，数量也不变，只是可能影响负载干燥度

 

解答：

应在变更流程中对无菌内衣的变更进行风险评估，充分评估此次变更产生的影响。如公司已经评估本次变更仅仅是影响负载干燥度，负载干燥度一般不影响灭菌效果，如果不变更灭菌程序和装载信息，可以不对灭菌程序进行验证（变更流程中，基于风险评估，导出此结论）。

扩展：因为无菌内衣本身的变更，以及灭菌负载干燥度的变化，可能导致洁净服无菌状态有效期的变化，应对此重新验证。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 68：一台脉动真空灭菌器，灭织物（121摄氏度），器具（125摄氏度）要分别作空载热分布吗，只是温度变了，也要做吗？

 

解答：

OQ应该确认上下限，比如低速和高速，具体测试的加液量需要根据系统设计文件中描述的加液范围及精度的控制等情况进行设置

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 67：湿热灭菌柜验证做液体装载热穿透时，要用500ml.1000ml.250ml三种规格的灭菌，是不是要分别做三种？

 

解答：

3种都要做，如果生产中是放在一起的就要一起做，生产中分开的就需要分开做，热穿透的探头在热分布实验中的冷点位置必须要放，大家的习惯做法是和满载热分布的探头布点方式保持一致，只是将探头放在物品中心位置。具体的灭菌柜的装载验证要结合实际的生产情况，如果正常生产时三种规格产品是分开灭菌的，就需要分别进行验证。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 66：一台脉动真空灭菌器，灭织物（121摄氏度），器具（125摄氏度）要分别作空载热分布吗，只是温度变了，也要做吗？

 

解答：

如果灭菌参数不一致，需要分别做的，空载热分布考察的就是温度，故温度变了需要考察。

理由：

 灭菌柜验证主要考察的就是一些关键的参数和指标，而温度是灭菌非常重要的参数，参数变化了，肯定是需要进行验证的。

参考：

N/A

 

Q 65：脉动灭菌柜BD试验程序，温度设置是不是需要与平常使用的灭菌程序一致？能给提供一下121℃BD包的厂家吗？ 

 

解答：

BD测试时要保证与灭菌程序有相同的空气去除阶段，温度和时间设置要符合BD测试包的要求。

市面上134℃的BD包主要是供医院使用的，也有专门针对制药工业设计的121℃的BD包，是一种多参数BD包，可以作为温度测试的补充，可以指示空气排除率、温度、时间、是否发生相变、蒸汽质量等参数都可以一次检测出来。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 64：湿热灭菌验证仪器探头必须监控疏水口温度吗？

 

解答：

一般情况下在认为灭菌柜的疏水口是系统的冷点，所以需要在温度分布验证过程中进行监控。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 63： 消毒柜有像灭菌柜一样要求F0值吗？

 

解答：

消毒柜主要是用于降低生物负荷，没有F0值的要求。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 62：罐子做OQ确认时加液控制程序确认设置加液量多少合适？除了覆盖日常使用量以外，还需要设置哪些液量？ 

 

解答：

具体测试的加液量需要根据系统设计文件中描述的加液范围及精度的控制等情况进行设置

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 61： 湿热灭菌柜验证做液体装载热穿透时，要用500ml.1000ml.250ml三种规格的灭菌，是不是要分别做三种？

 

解答：

具体的灭菌柜的装载验证要结合实际的生产情况，如果正常生产时三种规格产品是分开灭菌的，就需要分别进行验证。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 60：脉动灭菌柜BD试验程序，温度设置是不是需要与平常使用的灭菌程序一致？能给提供一下121℃BD包的厂家吗？ 

 

解答：

BD测试时要保证与灭菌程序有相同的空气去除阶段，温度和时间设置要符合BD测试包的要求。

市面上134℃的BD包主要是供医院使用的，也有专门针对制药工业设计的121℃的BD包，是一种多参数BD包，可以作为温度测试的补充，可以指示空气排除率、温度、时间、是否发生相变、蒸汽质量等参数都可以一次检测出来。

理由：

N/A

参考：

EN285-2015 Sterilization — Steam sterilizers — Large sterilizers

 

Q 59：一台脉动真空灭菌器，灭织物（121摄氏度），器具（125摄氏度）要分别作空载热分布吗，只是温度变了，也要做吗？

 

解答：

如果灭菌参数不一致，需要分别做的，空载热分布考察的就是温度，故温度变了需要考察。

理由：

灭菌柜验证主要考察的就是一些关键的参数和指标，而温度是灭菌非常重要的参数，参数变化了，肯定是需要进行验证的。

参考：

N/A

 

Q 58：双锥干燥混合器，性能确认做混合均一性呢还是做温度分布呢，我们没做温度分布，检查老师质疑，但未落缺陷。

 

解答：

1.是否做混合均一性的确认需要看设备的使用目的；

2.双锥干燥机的温度分布确认一般是不需要做的。

理由：

1.如果用双锥涉进行物料混合，则需要确认混合均一性。如果只是作为干燥使用，则不需要确认混合均一性；

2.，由于在干燥过程中设备一直在转动，物料处于“流动-混合”的状态，所以设备内温度分布的均匀性并不会对干燥效果产生严重的影响，但为了保证干燥效果应对干燥的均一性进行确认。

参考：

N/A

 

Q 57：关于干热灭菌计算FH值的参考温度，要求为160℃，Z值=20。请问各位是160吗？书上不是170吗？

 

解答：

就干热灭菌而言，计算FH时的参考温度没有强制的规定，目前主要是以160℃作为参考温度。其他参考温度也可以考虑

理由：

N/A

参考：

1.ISO 20857:2010 Sterilization of health care products — Dry heat — Requirements for the development, validation and routine control of a sterilization process for medical devices

2.PDA TR03 (2013) Validation of Dry Heat Processes Used  for Depyrogenation and Sterilization

3.PDA TR03 (1981) Validation of Dry Heat Processes Used  for Sterilization and Depyrogenation 

4.2010版药品GMP指南-无菌药品

 

Q 56：我们的产品要求的灭菌温度是115度，40分钟。做灭菌柜验证是不是得买热死亡时间为115度的指示剂？

 

解答：

生物指示剂的选择应根据灭菌程序设计阶段确定的杀灭时间（F 值）来确定，通过合适的生物指示剂证明所开发的灭菌程序实际达到了程序设计中确定的生物杀灭时间。

理由：

N/A

参考：

1.PDA TR01(2007)Validation of Moist Heat Sterilization Processes: Cycle Design, Development, Qualification and Ongoing Control

2.2010版药品GMP指南-无菌药品

 

Q 55：生产过程中或非生产过程中进行的设备维修，该维修并不影响产品质量，这种情况是否按偏差处理程序进行？

 

解答：

企业如果建立了设备维修相关的规程，维修过程完全按照规程要求规范进行，没有影响产品质量，这种情况不需要执行偏差程序执行。但是如果在维修设备过程中发现损坏的部件可能会影响到已经生产过的产品质量，那还是需要启动偏差管理程序。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 54：湿热灭菌验证中 生物指示剂如何布点，是与温度探头一致？还是可以比温度探头少？我们验证仪16个探头，是否每次需要16个生物指示剂？

 

解答：

一般情况下，热穿透测试和生物指示剂同时进行，生物指示剂放置在温度探头的测试点附近，温度探头放置多少个，生物指示剂就放置多少个。

理由：

热穿透数据只能确认温度，不能确认真实杀灭微生物的能力，微生物挑战试验可以为负载各位置具有同样的杀灭效率提供必要的证据。

参考：

N/A

 

Q 53：灭菌柜冷点位置是热穿透F0值最低的点吗？ 

 

解答：

是的，灭菌柜负载热穿透冷点位置是通过F0确定。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 52：脉动灭菌柜对分装工器具灭菌，这个装载量如果是变动的，是不是每种方式都要验证？比如说，两台分装机部件都装进去且验证了，那么有时候可能还要单独再消几个不锈钢桶，再加几个抄子什么的，还需要验证吗？最差条件怎么证明？比如说，16个桶已做验证，今天只要消4个桶，4个桶的装载方式还要做验证吗？

 

解答：

一般装载做最大装载，如果有变化，还需要做最小装载。蒸汽灭菌的特性，数量减少，位置不变，可以接受。不同的装载形式，都需要做3遍。同一种装载形式，如果最大装载是16个桶，最小装载是2个桶，最大做3遍，最小做3遍，那么最大和最小之间的都不用在做了。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 51：如何确定蒸汽灭菌柜的最小负载？

 

解答：

灭菌柜最小负载一般是生产过程中可能用到的最小装载。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 50：湿热灭菌柜保压实验抽真空的极限值有没有标准规定的，有一定要求保持在-92kpa的要求吗？

 

解答：

法规和指南未对灭菌柜真空泄漏率试验过程中的真空极限值做出规定。但GB8599-2008 中规定测试时需把灭菌柜内的绝对压力降到7kp或以下。

理由：

N/A

参考：

1.GB8599-2008 大型蒸汽灭菌器技术要求自动控制型

2.EN285-2015 Sterilization — Steam sterilizers — Large sterilizers

3.2010版药品GMP指南-无菌药品

 

Q 49：口服液体制剂微孔折叠滤芯过滤器需要完整性测试吗？

 

解答：

针对口服液体制剂微孔折叠滤芯过滤器，GMP中并没有规定必需要进行完整性检测，企业可根据实际情况自行决定。

理由：

中国GMP2010版，无菌附录中规定除菌过滤器和呼吸过滤器应进行完整性检测

参考：

N/A

 

Q 48：像热风循环烘箱这种，满载是否不需要按照按照国标的要求，计算分析温度均匀度？

 

解答：

一般情况下，需要对负载状态下装载方式对加热区维持温度均一性的影响进行研究和确认，制定标准时可以参考国标的要求，但最终还是要以满生产要求为标准制定的依据。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 47：烘箱类温度分布确认时，满载和空载冷热点不一致，正常吗？各三次，两次有差异

 

解答：

负载热分布测试的目的主要就是确定装载物对设备内空气热分布的影响，所以满载和空载冷热点不一致是正常的。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 46：GMP对发酵生产用灭菌蒸汽有什么要求？

 

解答：

GMP中并没有对发酵生产用的灭菌蒸汽提出明确的要求，但是为了控制污染以及保证灭菌效果，大部分企业发酵罐及配套管路的SIP还是使用纯蒸汽。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 45：请教：灭菌锅满载分布和热穿透一起做的，满载分布符合要求，但是热穿透不符合。可能是什么原因呀？

 

解答：

问题问的比较笼统，灭菌物品，灭菌参数等信息都没描述，热穿透不合格可能的原因较多，如：灭菌参数设置的原因；纯蒸汽质量的原因；装载方式、装载物包装及摆放的原因；指示剂的原因等等，实际的原因还需要从人、机、料、法、环、测这几方面系统的分析、排查一下。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 44：《灭菌/无菌工艺验证指导原则》中的一段话 “通常情况下，灭菌柜腔室最冷、最热点和平均温度之间的温差应不超过2.5℃。保温时间内温度波动应在±1.0℃之内，如果温度差别过大，提示灭菌柜的性能不符合要求，需要寻找原因并进行改进，重新进行验证。”这里面说的保温时间内温度波动应在±1.0度内怎么理解啊，是同一时刻各点间温度波动还是在整个保温时间内所有点之间的波动啊？

 

解答：

问题中的描述可以理解为：在保温阶段，每一个温度测试点的温度波动均需在±1.0度以内。

理由：

温度波动一般的理解为：同一温度测量点在一段时间内，最大与最小温度的差值的1/2，前面冠以“±”号，用以表示该温度测量点在一段时间内温度随时间的变化量。

参考：

JJF1101-2003_环境试验设备温度、湿度校准规范

 

Q 43：温度验证物理检测符合要求，但是生物指示剂不合格，该如何解决？在弄碎生物指示剂的外管的时候，有PH培养液少量流出，温度探头测出的F0值不低于15， 但相对应的生物指示剂培养结果不合格。

 

解答：

出现生物指示剂培养结果不合格的问题需要执行验证偏差的管理流程。问题中所说的“有PH培养液少量流出”可能是造成结果不合格的原因之一，但还是需要从人、机、料、法、环、测这几方面系统的分析、排查一下可能的原因。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 42：脉动灭菌柜的每种装载方式都要验证还是只需验证最小装载量和最大装载量？

 

解答：

每种装载都要做验证，如果其中一种装载在日常使用中有变化，需要做最大和最小装载。

理由：

  程序开发阶段主要是考察装载方式和灭菌参数等信息，对于不同的装载形式和灭菌形式是都需要进行验证的，至于有波动范围的装载方式，确认最大最小装载涵盖所有的装载量范围是可行的。

参考：

N/A

 

Q 41：关于设备在IQ过程中的initial cleaning的相关要求在美国的法规中有相关要求吗？

 

解答：

EU-GMP附录15，3.12条款要求，在OQ完成后，应当建立标准操作程序、操作人员培训以及预防维护保养要求。该问题应该是在GEP阶段，建议参考ISPE里GEP和C&Q。

理由：

设备安装就位后，清洁工作是需要的，清洁工作是需要的,但是并未提升到法规的要求，对于清洁维护保养会在SOP中制定并在日常中进行维护。

参考：

N/A

 

Q 40：做胶塞清洗机验证的时候，相应的指示剂怎么放入胶塞机？

 

解答：

用于验证用的无线探头及生物指示剂通常用透气袋或布袋包裹。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 39：注射用水灌装完成后进行水浴灭菌（121℃），每批装载最后一柜不满柜，我们做灭菌确认，需要满载和半载装载量都确认吗？

 

解答：

具体看公司对灭菌验证策略怎么制定，如

（1）装载量不固定，只做最大和最小装载的验证。

（2）验证常规的几种装载量，用专用的替代品补充至已验证的装载量。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 38：培养箱的温度分布也是按34399做吗，还有这个是新设备的是这样做，还是每年周期性的温度分布也是按这个做吗？

 

解答：

GBT 34399-2017只规定了对温控仓库、温控车辆、冷藏箱、保温箱及温度监测系统性能确认的内容要求和合格标准，对于培养用箱体，无需考虑此标准，培养箱的确认一般采用空载满载各24小时，严格一点可按实际培养时间进行确认，如48小时或72小时。

理由：

GBT 34399-2017要求比较严格，相对来说，对于常规培养用箱体，要求水平不会那么严格，可以按照常规库房类监测测试策略。

参考：

GBT 34399-2017医药产品冷链物流温控设施设备验证 性能确认技术规范

 

Q 37：

 

Q1:湿热灭菌柜验证，空载热分布三次、负载热分布三次,确认灭菌柜性能的温度分布情况和冷点及均一性，负载热穿透三次确认其灭菌能力，一台灭菌柜做九次会不会太多？可不可以负载热分布热穿透同时做？

Q2:那负载热分布还有意义吗，不如直接在排水口放个探头。           

Q3:热分布和热穿透同时做的时候，热分布2个探头热穿透10个探头合理吗？（之前看过指南说可以是1:5的数量）

解答：

A1:负载热分布和负载热穿透可以同时进行。                       

A2:负载热分布是考量负载状态下腔室内的温度均一性，装载方式的不同可能会对腔室蒸汽均一性产生影响，所以负载状态下应考虑热分布均一性。

A3:热分布探头太少的话不能更好的体现温度均一性，负载热分布探头数量及位置可以和空载热分布一致，布点应重点考虑腔体每个角落、腔体几何中心、疏水口温控探头及内室监测探头。热穿透探头的数量及位置应根据装载而定，考虑难易灭菌的装载物。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 36：头孢类的模拟灌装培养基是否需要吐温80之类的消除头孢类抗生素的杀菌影响的做法。再清洁破坏还是可能有微量残留？

 

解答：

模拟灌装后可以做促长实验，合格了就不用加，如果担心时间太长或不合格，可以考虑用小试的方法挑战一下培养基的促生长实验，做个前期的预确认。

理由：

 需要结合开发数据来决定具体实施细节。

参考：

2010新版GMP-无菌附录

 

Q 35：干热灭菌柜灭菌250度必须要45分钟吗，还是只要FH值到了就可以了？

 

解答：

250℃用于除热原的话，要求的FH值达到45即可。

理由：

   判定除热原效果的指标主要是FH值达到45，和时间长短无必然联系，时间长短来判定的话需要结合灭菌温度，通过公式计算出来是否FH达到一定数值才可以判定灭菌柜效果。

参考：

PDA TR No.3用于除热源和灭菌的干热工艺验证-2013

 

Q 34：放入湿热灭菌柜的温度探头一般怎么固定的？

 

解答：

弯折固定于内架车上或用湿热指示胶带固定。

理由：

固定探头常用灭菌指示胶带来固定，其一是为固定探头，其二可以指示是否灭过菌液，灭菌后的指示胶带会变深。

参考：

N/A

 

Q 33：灭菌柜验证时，空载和装载时都做了16个热分布点，请问热穿透时，也布16个温度探头吗？另外，生产过程，水浴灭玻璃瓶的大容量注射液时，是不是要有一个探头穿透到产品里？

 

解答：

验证用温度探头的数量应根据灭菌柜尺寸及装载物种类、装载物数量评估，热穿透数量与热分布数量不一定相同，热穿透探头应置于每个类型中具有代表性的装载物中。对于水浴灭菌柜，产品探头用于监控产品内部的灭菌效果，生产时应将产品探头布于产品中。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 32：配液罐做在线灭菌（SIP）时，各点的温度有上限要求吗？

 

解答：

对于空消程序一般会按≥121℃去考虑，上限温度主要基于元器件耐受温度和程序控制，可以不要求。如果是实消的计划，需要结合产品耐热性考虑设置温度上限。

理由：

 验证的最终目的是要满足用户的需求，所以要结合用户的需求来制定接受标准。

参考：

N/A

 

Q 31：隧道烘箱做温度确认，怎么布线？

 

解答：

空载温度测试中探头基本上是摆一排，满载测试中需要考察热穿透（一般分前中后阶段），满载热分布测试不是必须项。

理由：

空载和满载考察的重点不一样，空载热分布主要考察温度分布的均一性，满载主要考察灭菌/除热原效果，要结合穿透温度和内毒素挑战结果。

参考：

N/A

 

Q 30：脉动灭菌柜装载方式改变，变更时对验证状态应该怎样评估？

 

解答：

装载方式改变后，需对改变后的装载方式进行验证，包括生物学及物理学验证，必要时还需确认装载物灭菌后的干燥效果。

物理学确认：热分布确认、热穿透确认。

生物学确认：生物指示剂挑战确认。

如改变后的装载方式验证不合格，需对装载进行重新调整，如装载物的数量、装载物的位置、装载物的包装方式等因素。装载方式验证合格后可进行日常使用。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 29：培养箱的温度确认条件按照设备精度进行，还是按照培养条件进行？

 

解答：

设备厂家所标示的精度与你所理解的精度可能概念不同，标示精度通常指箱体温控传感器的精度，不要将传感器精度与箱体温度均匀度，温度波动范围等混淆。所以验证主要考虑设备是否符合使用需求，如温度分布是否均匀，箱内各点温度波动范围是否达到所需要求。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 28：高压灭菌锅验证，由于设备没有验证孔，温度分布怎么进行？有线可以验证么？ 

 

解答：

高压灭菌锅一般没有验证孔，腔室也没有冗余的孔洞，灭菌锅的验证常使用无线温度探头。

能否使用有线温度验证仪，需评估一下是否可以从锅盖密封圈引线，如锅盖密封过程存在热电偶极易损坏的风险，建议不要采用有线温度验证仪。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 27：成品常温库和原辅料阴凉库的温湿度分布验证，是否需要做断电确认和开门确认？温湿度检测仪布点可以依据什么？

 

解答：

有温湿度控制要求的成品常温库和原辅料阴凉库受季节影响较大，通常进行冬季和夏季温湿度分布验证时进行断电确认和开门确认。

对于库房与其门外区域公用一套空调系统的情况，库房内外温湿度相同，开门可能不会影响温湿度变化，此时开门测试意义不大。

理由：

断电测试确认库房的保温能力，当库房内外温湿度差异较大时，库房断电会影响库内温湿度变化，甚至超出可接受范围。

开门测试为日常操作提供合理开门时间参考值。当库门内外温湿度存在差异时，开门会影响库内温湿度改变，甚至超出可接受范围。

参考：

WHO TRS 961, Annex 9, Supplement 7: Qualification of temperature-controlled storage areas

WHO TRS 961,Annex 9,Supplement 8: Temperature mapping of storage areas

 

Q 26：温度验证用设备一般分两种：有线温度记录仪的和无线温度记录仪，两种探头使用时是否都需要进行前后校准？

 

解答：

为证明测试用温度记录仪在测试过程中数据采集准确，通常进行使用前的校准及使用后的确认。

对于有线温度记录仪，一般都均有探头使用前的校准功能和使用后的确认功能。前校准和后确认的周期可以通过评估确定，校准周期如每天使用前后进行、每周使用前后进行、每3遍测试前后进行、每9遍测试前后进行等。

对于无线温度记录仪，也应进行使用前的校准及使用后的确认。有些厂家的产品能够实现探头的前校准及后确认活动，如KAYE无线温度验证仪。有些厂家的产品没有前后校准功能，此类仪器除了进行年度计量，尽可能在使用前后进行温度对比测试，确认温度记录仪使用过程采集点数据准确可用。温度对比测试如使用校准过的油浴或其它温度场。

理由：

温度验证用探头经常在不同温度环境下使用，测量数值存在漂移现象，测试过程可能会出现偏差，为保证测试过程的数据采集准确可能，通常进行使用前的校准及使用后的确认。

参考：

N/A

 

Q25:做BD程序的时候温度要求是121℃还是134℃，设备供应商说根据灭菌温度制定，但BD的说明书是134℃？

 

解答：

BD测试一方面可以反映空气的排除效果，另一方面可以一定程度上反映出进入到内室的蒸汽的质量。进入到灭菌柜的灭菌阶段是蒸汽进入室加压，穿透，灭菌的过程，121℃和134℃的程序在表面参数设置上只有温度和压力不同，参数背后还有其他设定，比如：补气速率，排水频率，加套温度，蒸汽散流板散流方式，以及补气触发温度等综合作用完成。这些隐含的参数不一定是相同的，所以这两个不同温度的灭菌可以认为是两个程序。所以建议使用哪个温度灭菌就用哪个温度段的BD包。

理由：

由于不是唯一的参数标准，所以不能孤立的回答BD程序应该是121℃或者134℃，需要充分考虑待灭菌物品的灭菌温度要求和BD包的说明书，需要根据产品灭菌要求购买合适的BD包。

参考：

N/A

 

Q 24:隔离器灭菌过氧化氢浓度一般要多少，灭菌彻底？

 

解答：

因VHP灭菌受通风循环比例、温度和湿度的影响，通常需要供应商来进行灭菌工艺开发（可能处于技术保密的原因，不同的供应商对浓度没有明确的告知），通常在200-300ppm就能达到灭菌效果。我们做过的有400ppm的，也有要求125ppm，最终都能达到灭菌的效果。这就和灭菌时温湿度等参数有关了。

理由：

VHP灭菌效果并非仅仅与其浓度有关，还受环境温度，湿度等影响，所以不能单纯的只对浓度一个限定值来保证灭菌的有效性。

参考：

N/A

 

Q 23:除菌过滤器的再验证周期一般多长时间？

 

解答：

在最开始选择滤芯的时候，随着相容性、溶出、截流能力等确认时，也应该已经做过确定使用次数的确认，一般都用来作为首次确认，这是作为过滤参数的主要参考依据，日常的泡点测试或者水侵入测试可以及时反馈过滤器的状态，如果没有相关的变更且定期都有供应商审计的话，可以不做再验证了，因为指南里没强制要求。但是条件允许，还是建议通过风险评估确认下过滤系统中等级较高的项目，定期验证下过滤系统的安全性还是有必要的。

理由：

完成过滤工艺的验证之后，还应当定期评估产品性质和工艺条件，以确定是否需要进行再验证。产品、过滤器、工艺参数等变量中任何一个发生改变，均需要评估是否需要再验证。根据评估结果，以决定是否需要开展再验证，无明确的法规规定再验证周期。

参考：

NMPA 除菌过滤技术及应用指南

 

Q 22:存放菌种斜面2℃到8℃，一般放普通冰箱的冷藏室，这个精度有些难达到0.5℃的波动，有些培养箱的温度波动也比较大一点，也是严格按这个文件吗？

 

解答：

如果有明确的冷藏温控要求，一般不建议使用普通冰箱，建议使用医用冷藏箱，控温精度高。如果使用的箱体温度波动较大，需评估对存储的物品的影响。

理由：

根据工艺需求来选择合格的设备，有些不适用的设备可能无法达到工艺需求。

参考：

N/A

 

Q 21:在进行配制罐灭菌验证时选用什么样的生物指示剂？

 

解答：

不使用 MesaStrip 的孢子条，包装容易湿，孢子有泄露到罐体里的风险。推荐使用自含式BT20，空载，或者安瓿瓶指示剂BT22，空载满载都适用。滤纸片的孢子条一般用于环境熏蒸。

理由

选取生物指示剂需要考虑物理化学性质的适用性以及操作上的适用性，对于不用种类都适用的指示剂建议选择不容易产生污染风险的款式。

参考：

PDA TR 61 在位灭菌 2013

GBT 19972-2018

医疗保健产品灭菌 生物指示剂选择、使用和结果判断指南，2018年10月01日实施

 

Q 20:在仓库或一些控温设备（干燥箱、冰箱）的OQPQ时，会做空载及负载的一段时间温度分布，比如冷链新国标GBT34399，要求采集时间不少于48小时。这个48小时是重复三次，48*3；还是只要一次就好了？

 

解答：

国标GB/T34399中并没有要求重复测试，数据采集时间不少于48小时，如进行72小时或连续7天。具体的测试时间还应根据设备/库房具体的运行情况确定（如：程序设定在控温过程中需多台机组交替运行，测试时间则需至少覆盖该运行程序的整个过程）。

理由：

N/A

Q 19:做穿透的时候每个热电偶都进行穿透，每个穿透的物品都放指示剂吗，还是只放冷点位置？

 

解答：

满载时需要验证的指标有热分布和热穿透及生物指示剂挑战，热分布需要使用的探头数量指南中有举例，热穿透的数量要根据你的装载方式来评估需要用多少个热穿透探头，不同的装载方式评估的结果不同，热穿透探头的数量也不同，这个数量没法固定。认为有风险的位置就放。一般测试时热穿透的位置会一同放生物指示剂。

理由：

周期设定和确认过程中，生物指示剂在产品和装载中的放置位置，应当是对灭菌过程最严格挑战的地方，指南建立常规测试中把生物指示剂放在过程挑战装置中，可作为参考，常规执行测试过程一般是指示剂位置和测试探头数量和位置保持一致。

参考：

GBT 19972-2018

医疗保健产品灭菌 生物指示剂选择、使用和结果判断指南，2018年10月01日实施

 

Q 18:做稳定性实验箱验证的开门实验，门打开一分钟后湿度就从60％降到30％，超出规定范围，一般关门半小时能恢复。所以开门实验还有必要做吗，怎么定可接受标准合适呢？

 

解答：

开门测试考虑两方面：

1.开门后温湿度超出可接受范围的时间，

2.关门后温湿度恢复到可接受范围的时间，

通过开门测试，研究合理的开门时间及两次开门的时间间隔。开门测试可以没有具体的标准，测试结果仅对设备使用提供参考值。

理由：

断电开门实验只是给日常使用提供一个参考值，这个过程和数值是参考验证的结果得出来的。

参考：

N/A

 

Q 17:干热灭菌柜的侧高效压差，工作室压差以及进风口压差有没有标准规定？

 

解答：

GMP规定：“干热灭菌时，灭菌柜腔室内的空气应当循环并保持正压，阻止非无菌空气进入。进入腔室的空气应当经过高效过滤器过滤，高效过滤器应当经过完整性测试。”

压差范围没有明确标准，压差范围应参考设备供应商的设计资料。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 16:灭菌柜验证，3M，BD试验包说明书上写132-134度3.5分钟，但是我们灭菌柜灭菌不带小数点，只能设3分钟或4分钟，怎么办？

 

解答：

应按照说明书建议时间进行BD测试，灭菌柜计时一般采用秒为单位，3.5分钟即为210秒。

理由：

需要根据产品灭菌要求购买合适的BD包，具体的时间以说明书为准，以秒为单位。

参考：

N/A

 

Q 15:无菌灌装设备PQ验证中有必要进行无菌检查吗？因为后面还会做培养基模拟灌装对整条线的无菌性进行检查。

 

解答：

不是必须要做，PQ主要关注设备性能，如灌装装量、踢废功能、A级层流送风性能。

理由：

设备的PQ考察的是设备的性能，无菌保证以培养基模拟灌装和后续的工艺验证来确保。

参考：

GMP实施指南 2010版 无菌药品

 

Q 14:灭菌柜的平衡时间必须要符合EN285吗？器具灭菌呢？都是过度灭杀吗？

 

解答：

平衡时间满足要求能证明装载中冷空气去除能力和加热能力，如平衡时间达不到要求，建议进行灭菌程序的开发，如改变装载方式、增加脉动次数、改变脉动上下限等措施。通过评估器具的耐热性选择合适的灭菌方法，平衡时间针对的是多孔/坚硬装载，器具的耐热性较强，一般采用过度杀灭法。

理由：

 是否需要过度灭菌需要结合产品和被灭物品的特性来决定，对于器具类的一般过度灭菌是比较保险且风险较低的做法。

参考：

PDA TR No.1湿热灭菌工艺验证：循环设计、研发、确认和持续控制-2017

Q 13:无菌灭菌验证f0是多少合适？180度的干热灭菌柜的Fh值多少是被接受的？

 

解答：

对于湿热灭菌耐热的装载，欧盟及中国常采用15分钟，FDA采用12分钟；不耐热产品的灭菌，通过研究装载的生物负荷及耐热性，设计灭菌F0标准。中国药典规定，干热灭菌条件一般为（160〜170℃）X120min以上，(170〜180℃)X60min以上或 250℃X45min 以上，也可采用其他温度和时间参数。干热灭菌FH值一般大于170℃60分钟。

最新欧洲药典的征求意见5.1.12针对注射剂生产的材料除热原给了更新征求意见，提到常用的干热循环除热原需要在250℃下至少30min，也可以与其他温度如170℃和相应的时间结合，另外对内毒素的回收率有要求最少减少3个对数值，如果内毒素数回收率低于100%,需要对内毒素数量进行相应调整。

最新的USP 1228.1《干热去热原》部分针对去热原也有了相应的更新。不再要求250℃×30min的去热原参数，也不再要求内毒素下降3个log，USP定义的去热原工艺标准为内毒素含量≤0.1EU。

理由：

  针对各国各机构的要求求同存异，宗旨是一样的，就是要确保无菌保证性。具体接受标准和参考也要考虑自己的认证机构目标。

参考：

PDA TR 01 Validation of Moist Heat Sterilization Processes:Cycle Design, Development,

Qualification and Ongoing Control，2007

PDA TR 03 Validation of Dry Heat Processes Used for Depyrogenation and Sterilization，2013

 

Q 12:灭菌时空载温度分布均匀性，是从设备自身探头达到验证温度即开始计算还是怎样，因为灭菌器国标是要在达到验证温度后半小时开始计算？

 

解答：

温度分布验证计时与灭菌柜灭菌段计时要保持一致，研究整个灭菌阶段的温度均匀性。

理由：

温度分布均一性好坏判定是在达到灭菌温度后根据程序设定的时间要求结束后根据各点的温度衡量各点的均一性，具体灭菌程序时间并非限制在半小时，国标也未提到半小时这一描述，要求是灭菌维持阶段同一时刻最大温差不大于2℃。

参考：

EN285 Sterilization Steam Sterilizers Large Sterilizers-2015

GB 8599-2008 大型蒸汽灭菌器技术要求（自动控制型）

 

Q 11:新冷库投入使用，是空载满载的分别做48小时可以了是吗？不用说满载做3次48小时吧？

 

解答：

国内标准，中国GSP规定温度测试需48小时，过国外认证，推荐72小时。WHO的技术报告提到对于能够进行温度控制，不直接受外界环境影响的区域可进行连续72小时监测，对于不能主动控制温度，完全凭借外界环境的系统需要连续7天监测。

因此，不需要连续3次，48小时已经足够了。从出发点来说，连续3次是考察测试结果的重现性，避免偶然性结果。对于间歇运行设备来说，可以连续运行3次进行测试。对于连续运行设备/系统来说，一般推荐连续3个代表性周期（如：24小时×3=72小时）。对于48小时，是相关法规指南作的规定，是已经考虑了重现性的因素在内的。

理由：

    对于冷库的温度分布要求法规是比较明确的，可以参考具体国内外要求，对于常温库和阴凉库等非冷库，没有强制要求，可参考GSP要求和产品特性进行确认验证持续时间。

参考：

中国，良好的经营管理规范(GSP) 附录-验证管理-2016 .12.26 

WHO Technical Report Series, No. 961, 2011，Annex 9: Model guidance for the storage and transport of time and temperature–sensitive pharmaceutical products

 

Q 10:湿热灭菌柜验证，设定温度为121摄氏度，验证过程中所有温度都在122度以上，请问这种情况需要写偏差吗？

 

解答：

不同法规对温度分布规定的范围不同，如果验证的温度范围超出你所规定的接受标准就算偏差。

理由：

常见法规指南要求，比如EN285-2015版第8.2.1.1部分要求接受标准是最低温度要求的上限+3也就是121-124℃，所以验证过程温度都在122以上，如果都在121-124的范围内的话，还是符合要求的，如果企业有自己更严格的内控标准，也需要考虑。

另外国内的灭菌器的GB5.8.3.1也提到灭菌温度翻译要求下限为灭菌温度，上限应该不超过灭菌温度3℃。

另外衡量灭菌成功与否除了温度要求外，还有更重要的指标就是F0值，需要根据工艺需求全面考虑。

参考：

EN285 Sterilization Steam Sterilizers Large Sterilizers-2015

GB 8599-2008 大型蒸汽灭菌器技术要求（自动控制型）

 

Q 9:灭菌柜121度热分布验证合格，115度放同样的位置温度不合格，最高到119，普遍超高，然而设备腔体内移动探头温度合格，最高117多，是怎么回事？

 

解答：

1.首先看腔室内压力和夹套压力设定值，如果腔室内压力过高，腔室内温度会偏高，如果夹套压力明显高于腔室压力的话，腔室内也会产生过热，温度也会偏高。

2. 如果腔室及夹套内压力设定值合理，考虑PID调节阀的开度及关度，可能在灭菌段开度过大，一般厂家在出厂前设定好此参数，但不一定合理，最好在灭菌程序开发阶段确定此参数。

理由：

温度大小和压力有一定关系，不同温度下压力的影响也是不同的，所以121℃合格的情况下，115℃不合格也是可能存在的。需要考虑压力对温度的影响。

参考：

TR No.1 湿热灭菌工艺验证：循环设计、研发、确认和持续控制-CHN-2007

 

Q 8:做灭菌柜验证的时候，三次验证的灭菌柜最冷点如果不在一个地方,如何确定最冷点？

 

解答：

灭菌柜装载的冷点应固定一致，如果在验证过程没有发现明确的冷点，可以考虑把热穿透F0值较低的几个点位进行分析，如果F0相差很小，考虑将F0值较低的几个点定义为冷点。

理由：

灭菌柜三次验证的冷点如果不固定，应首评估原因如：设备设计是否合理，如蒸汽散流、装载准备及摆放是否一致、热穿透布点位置是否一致、程序起始温度是否相差较大、蒸汽质量是否稳定、如分析后无明确原因，再考虑将F0值较低的几个点作为冷点。

参考：

N/A

 

Q 7:关于灭菌柜再确认，多种装载是否需要在再确认时均执行，还是可以评估最差条件（首次均已做）？

 

解答：

针对不同种类的装载方式，每种装载方式再验证一般每年至少一次，不建议减少验证工作量。针对同种装载的不同装载大小，比如 满载/半载/最小装载，首次如果全部经过验证的话，再验证假如想减少装载方式测试，需要经过风险评估确保受控。再验证周期一年的举例适用于无菌产品器具等灭菌，不适用于灭废等其他种类灭菌柜。

理由：

装载方式是在程序开发阶段确定的，且各装载程序之间没有必然的包含关系，首次验证后针对不同的装载和程序需要逐一进行再确认。

参考：

EU GMP附录1 无菌药品生产-2017征求意见稿

 

Q 6:做罐系统灭菌空消的时候，用不用考虑罐体内部温度均匀度？

 

解答：

罐体空消主要考虑的是罐体内部的灭菌效果，首先F0值需要满足要求，对于温度均匀度，法规指南没有明确要求，但应给出可接受的温度范围。

理由：

罐体的空消灭菌也就是常说的SIP，需要结合灭菌程序开发的数据制定灭菌参数，常规是121℃，15或30分钟，针对温度均一性的范围要求，法规没有明确指出，但是可以结合工艺和内控标准制定。

参考：

N/A

 

Q 5:QC灭菌柜做验证，这次按照购买的培养基115度20分钟的灭菌方式进行验证，F0值5点几，那种F0值大于8的生物指示剂也灭掉合格了，到时检查会有问题的吧？ 

 

解答：

对于不耐热物品的灭菌，如采用F0值小于8的灭菌程序，需研究灭菌物品的微生物负荷及微生物耐热性，设计一个能达到10-6无菌概率的灭菌程序。你们采用115℃20分钟，说明F0达到5就满足所设计的灭菌要求，但选择F0大于8的生物指示剂不合适。

理由：

最好和生物指示剂供应商沟通确认一下生物指示剂的生物负荷及耐热性是否存在改变的可能。

参考：

N/A

 

Q 4：培养箱验证中的问题，培养箱温湿度测试有规定测试周期和频次吗？

 

解答：

对于环境实验设备，法规没有规定测试的周期、频次，不同指南建议也有所不同，对于测试周期，一般推荐连续3个代表性周期（如：24小时×3=72小时），对于测试频次，可根据设备用途、再验证策略等信息进行评估。

理由：

非强制性验证周期的设备和系统需要基于用户需求和风险评估来确定测试周期和频次。

参考：

N/A

 

Q 3：冻干机是否需要做满载下的板层温度分布，如果需要是采用有线探头还是无线的？ 

 

解答：

冻干机的板层温度均一性是考量设备本身性能，通常只进行空载均一性。满载状态通常进行冻干性能的确认，确认冻干后的产品质量（如含水量，复溶性等指标）符合要求。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 2：立式蒸汽灭菌器115℃ 20min灭菌合格标准是什么？ 

 

解答：

115℃灭菌20min不属于过度杀灭法，灭菌合格也分两方面考量，物理学及生物学。F0需达到灭菌程序开发时所确定的标准，所选生物指示剂达到预期的灭菌效果。

理由：

N/A

参考：

N/A

 

Q 1：灭菌柜的F0达到多少符合要求？是以121℃为基准吗？ 

 

解答：

不同国家或机构对灭菌F0的要求有所差异，PDA技术报告NO.1将F0大于12定义为过度杀灭法，中国及欧洲将121℃灭菌15分钟定义为过度杀灭法。

F0是指Z取10℃时，一个湿热灭菌程序赋予被灭菌品121℃下灭菌的等效灭菌时间。计算F0时以121℃为参照温度，F0计算公式如下：F0 =ΔtΣ10(T- 121)/10

理由：

N/A

参考：

N/A