【问】药品微生物检验用的试验菌种在保存和传代时有哪些注意事项?

【答】常用的标准菌株保存时，建议应有两套。一套供保存传代用，另一套供日常使用时引种用。保存和传代过程中，应严格无操作防止菌种被污染，需要注意的是铜绿假单胞菌不宜用低温斜面法保存。工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5代(从菌种保藏机构获得的标准菌株为第0代)，以防止过度的传代增加菌种变异的风险。1代是指将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养，任何形式的转种均被认为是传代1次。必要时实验室应对工作株的特性和纯度进行确认。工作菌株不可替代标准菌株，标准菌的商业衍生物仅可用作工作菌株。

用于微生物转种、培养以及检验工作的所有操作物品比如平试管、菌液、被污染或染菌的物质等，在废弃或再使用前必须1、灭活，比如进行高压蒸汽灭菌处理。实验室必须建立并保存菌种管理的程序文件和记录如菌种的进出、收集、保藏、确认试验、传代、使用等。

来源:药品GMP指南第2版质量控制实验室与物料系统(P270)