在制药厂中，灭菌是关键中的关键。这个关键中，如何确认灭菌的效果呢？如何知道产品中的细菌是完全被杀灭的？

在灭菌程序验证中，尽管可通过灭菌过程某些参数的监控来评估灭菌效果，是否存在一个东西像X光一样显示、测试、监控所有的产品细菌数？像电视一样直接明了？生物指示剂就是这台X光机。

生物指示剂的法规要求：

做灭菌的人应该都知道，对于生物指示剂，各国都有相应的标准和法规来规范生物指示剂的生产、使用和质量控制。

在我国，生物指示剂的生产和质量应符合《中华人民共和国药典》以及相关医疗器械标准的要求。

在国际上，ISO11138系列标准等对生物指示剂的性能、检测方法等做出了详细规定，以确保生物指示剂的质量和可靠性，保证消毒、灭菌过程的有效性和安全性。

一、什么是生物指示剂呢？

生物指示剂是一类特殊的活微生物制品,对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。

可用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等.

用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。它一般如下几种分类方法划分：

1、按结构分为片状生物指示剂和自含式生物指示剂；

2、按监测灭菌工艺分为环氧乙烷灭菌生物指示剂，湿热灭菌生物指示剂，辐照灭菌生物指示剂，干热灭菌生物指示剂，过氧化氢灭菌生物指示剂等；

压力蒸汽灭菌生物指示剂：专门用于监测压力蒸汽灭菌过程。一般含有嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，在压力蒸汽灭菌条件下，若灭菌效果达到要求，芽孢应被完全杀灭。

干热灭菌生物指示剂：通常以枯草芽孢杆菌芽孢为指示微生物，用于判断干热灭菌过程是否有效，可检测干热灭菌设备是否能达到规定的温度和时间，以确保灭菌效果。

环氧乙烷灭菌生物指示剂：也是以枯草芽孢杆菌芽孢为主要指示微生物，用于监测环氧乙烷灭菌过程。环氧乙烷是一种常用的低温灭菌剂，通过检测生物指示剂中芽孢的存活情况，可判断环氧乙烷灭菌的浓度、时间、温度等参数是否合适。

过氧化氢等离子体灭菌生物指示剂：常采用嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，用于监测过氧化氢等离子体灭菌过程的有效性，确保在低温、低湿度的等离子体环境下，灭菌过程能够彻底杀灭微生物。

3、按培养时间分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。

4、按微生物种类分：

细菌芽孢生物指示剂：最常用的一类，如嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢用于指示压力蒸汽灭菌效果，枯草芽孢杆菌芽孢用于指示干热灭菌、环氧乙烷灭菌等效果。细菌芽孢具有很强的抗逆性，能耐受高温、干燥、化学消毒剂等多种不良环境，是理想的指示微生物。

真菌孢子生物指示剂：如白色念珠菌孢子等，可用于某些特定消毒方法的效果监测，常用于评价抗真菌药物或消毒措施对真菌的杀灭效果。

病毒生物指示剂：在一些对病毒灭活有严格要求的领域，如疫苗生产、血液制品处理等，会使用病毒生物指示剂，如脊髓灰质炎病毒等，来监测消毒或灭活过程对病毒的去除或灭活效果。

它一般由菌片、培养基和指示系统组成。菌片上含有一定数量的特定微生物，培养基为微生物提供生长所需的营养物质，指示系统用于显示微生物的生长情况，如颜色变化、荧光反应等。

二、生物指示剂的作用：

1、对任何灭菌设备性能，灭菌工艺效果的验证，可通过得到的物理参数如热分布与热穿透数据, 来估测一个灭菌程序对微生物的致死性。但物理参数并不能直观反映微生物的杀灭程度，保证是否达到规定的“无菌保证水平（SAL的定义为产品经灭菌/除菌后微生物残存的概率，国际上一致规定SAL不得大于10）”。生物指示剂就是为了保证整个灭菌过程达到SAL 水平而应用的,它能综合反映影响灭菌效果的各种因素。

2、无菌检查是无菌产品质量控制的一个重要指标。但无菌检查是抽样检查，而微生物污染属非均匀污染，由于抽样的概率问题，生产过程中产品灭菌效果不符合要求往往难以用无菌检查结果反映出来，除非是较严重污染的情况。因此，无菌产品的无菌保证不能依据终产品的无菌检查结果，而需要通过生物指示剂的挑战试验来监控。

三、生物指示剂一般用在哪些地方？

它被广泛地应用于多个领域：

医疗卫生领域：在医院的手术室、消毒供应中心等部门，用于监测手术器械、敷料、注射器等医疗用品的灭菌效果，确保医疗用品的无菌状态，防止交叉感染。

制药行业：对药品生产过程中的灭菌环节进行监测，如药品包装材料、原料药、制剂等的灭菌，保证药品的质量和安全性。

食品加工行业：用于监测食品加工过程中的消毒、灭菌效果，如罐头食品的高温灭菌、饮料的巴氏消毒等，保障食品的卫生质量，防止微生物污染导致的食品安全问题。

生物安全实验室：在生物安全实验室中，用于监测实验室设备、环境的消毒灭菌效果，确保实验环境的生物安全性，防止病原微生物泄漏。