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抗体的制备、纯化、评价、胶乳偶联技术总结(33页)
目录
一、抗体的制备与纯化 5
(一) 抗体的概念5
(二) 抗体的本质、结构和类型5
(三) 抗体的产生5
(四) 抗体的制备5
1所需原料 5
2抗体的制备程序 6
(五) 单克隆抗体与多克隆抗体的特点与区别7
(六) 抗体纯化的方法、原理和特点 7
二、抗体纯化方法简明手册 8
(一) 盐析法 9
1主要材料 9
2影响盐析的因素 10
3盐的性质 10
(二) 冷酒精沉淀法10
(三) Deae-sephadexa-50 柱层析法 11
(四) SPA-sepharosecl-4b 亲和层析法 12
(五) 高效和液相色谱 14
三、TMB 可溶性底物、HRP 酶稳定剂、弗氏佐剂和不完全佐剂的说明书 14
(一) TMB 可溶性底物(TMBSolubleSubstrate)14
(二) 辣根过氧化物酶稳定剂(HRPSTABILIZER) 15
(三) 弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 Freund'sAdjuvant,CompleteandIncomplete 16
四、抗体保存指南17
(一) 保存温度和条件 17
1特别注意:特殊保存条件 17
2用叠氮化钠防止污染17
3不使用叠氮化钠的情形 18
(二) 冷冻/融化损伤 18
五、不同来源的抗体纯化的方法和注意事项 18
(一) 不同来源的抗体 18
1抗血清19
2组织培养血清19
3腹水 19
六、短期免疫抗血清制备及抗体效价检测 19
(一) 实验一:免疫19
1实验动物的选择 20
2实验步骤 20
(二) 实验二:抽血、放血,分离抗血清20
1取血 21
2抗血清的分离,保存21
(三) 实验三:ELISA 法测定抗体效价21
1实验材料 22
2实验步骤 22
3结果分析 23
(四) 玻片法—血型鉴定(兴趣实验) 24
1实验方法和步骤 24
2实验结果分析24
七、荧光微球标记抗体方法及问题分析25
(一) 胶乳大小选择25
1【求助】免疫胶乳或免疫颗粒(聚苯乙烯)的粒径 - 丁香园论坛 25
(二) 胶乳标记方法25
2【交流】蛋白如何偶联到聚苯乙烯乳胶颗粒上 - 丁香园论坛25
3【求助】胶乳标记 - 丁香园论坛26
4【求助】抗原或抗体致敏胶乳的缓冲液和 pH 值 - 丁香园论坛 27
(三) 胶乳标记过程问题 27
5【求助】胶乳偶联出现絮凝 - 丁香园论坛 28
八、胶乳标记过程中常见问题集28
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