前言
分析方法的专属性和灵敏度是方法能够使用的前提，而精密度和准确度则是研发人员不断追求的目标。为什么这么说呢？接下来我们就来简单说说方法的精密度（Precision）和准确度（Accuracy），看完之后可能你就会理解我的说法了。
精密度和准确度
首先为什么要把这两个放到一起来说？
就像方法验证中的定量限和检测限，精密度和准确度也是紧密相关的两个项目。良好的精密度是方法具有较好准确度的必要条件，但是良好的准确度还与其他因素（如基质干扰、溶液配制、结果计算等）有关。
接下来咱们来看它们具体的定义：
精密度：系指在规定的测定条件下，同一份均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差（Deviation）、标准偏差（SD）或相对标准偏差（RSD）表示。
在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性;
在同一实验室内的条件改变，如不同时间、不同分析人员、不同设备等测定结果之间的精密度，称为中间精密度;
不同实验室测定结果之间的精密度，称为重现性。
准确度：准确度系指用所建立方法测定的结果与真实值或参比值接近的程度。一般用回收率（Recovery）表示。
准确度应在规定的线性范围内试验。
准确度可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。
那为什么说精密度和准确度是研发人员一个追求的目标呢？
首先：不是所有的方法都需要精密度和准确度的，比如定性方法。
其次：定义中可以看出来它们代表的都是一种接近程度。对于程度的探寻，它是永无止境的。
最后：我们需要了解方法验证的目的，除了证明方法满足预期用途之外，更重要的一点就是确认方法误差的来源和大小。方法的精密度和准确度取决于方法开发过程，因此它是一个研发人员追求的目标。
既然提到了误差，接下来咱们就说说方法的误差。
误差这个词相信大家都不陌生了。我们将分析结果与真实结果之间的差值称为误差。它是方法固有的，无法避免的。按照类型主要分为两类：
一）系统误差：它是由某种确定的原因引起的，一般有固定的方向（正或负）和大小，重复测定可重复出现。根据系统误差的来源，又可区分为方法误差、仪器误差、试剂误差及操作误差等。
方法误差：由于分析方法本身的缺陷或不够完善所引起的误差。例如，在滴定分析法中，由于滴定反应进行不完全，或干扰离子的影响，导致终点判断不准确。
仪器误差：由于所用仪器本身不够准确或未经校正所引起的误差。例如，砝码、滴定管刻度不够准确等。
试剂误差：由于试剂不纯或含有杂质引入的误差。
操作误差：由于操作人员的习惯而引起的误差。例如，读取滴定管的读数时偏高或偏低。
这类系统性误差（Systematic error）实际影响的是结果的真实性（Affect Trueness），即与真实值的偏离程度。
二）偶然误差：或称随机误差，它是由不确定的原因引起的，可能由于实验时环境的温度、湿度和气压的微小变化以及其他操作条件的微小波动所造成，其方向（正或负）和大小都不固定。
这类随机性误差（Random error）实际影响的是结果的精密度（Affect Precision），即数据间的离散程度。
因此，我们用一个等式来描述那就是：
注：偶然误差可以通过增加平行试验来减小；系统误差可以通过空白、对照和回收试验来校正。
讲到这，相信大家对准确度和精密度已经有了一个基本的认识了。准确度，它是一个综合的结果，它是所有误差相互作用后的最终体现。而精密度，它是通过统计学工具呈现出来的数据结果的偏差大小，主要是反映随机误差的影响。
这里为了便于大家理解，我们将准确度称为总体准确度（Overall Accuracy），它的含义是将测试样品制备的误差、基质的干扰以及结果计算的误差都考虑进去。即
基质的干扰指的是测试溶液中除目标物以外的所有成分（对于有关物质而言，其主成分、溶剂、其他杂质都是干扰基质），对目标物检测产生的干扰（如增强或抑制）。因此，这也是为什么在进行准确度验证的时候，法规指南推荐的方法是加标回收率，主要目的就是评估基质的干扰。
如下图所示，若线性溶液和准确度溶液配制的基质不同，往往会导致实际的标准曲线不同。我们在验证过程中需要注意不同溶液中的基质差异。
精密度和准确度还受到样品取样、称量、定量稀释等溶液配制过程中的误差影响。换句话说，方法的精密度和准确度不会好于测试溶液制备的精密度和准确度。
举两个例子说明下这个问题：
1）我们准备将储备液稀释100倍，实验室使用的是A级的移液管和容量瓶，你觉得以下哪种方式是最准确的？
先1.0ml/10ml，再1.0ml/10ml
先5.0ml/50ml，再5.0ml/50ml
先10.0ml/100ml，再10.0ml/100ml
1.0ml/100ml
2.0ml/200ml
5.0ml/500ml
要回答这个问题，我们首先得知道A级移液管和容量瓶对应的允许误差（参考JJG196-2006），
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仪器规格
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容量允许误差
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相对误差
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1ml移液管
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0.007ml
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0.7%
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2ml移液管
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0.01ml
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0.5%
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5ml移液管
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0.015ml
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0.3%
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10ml移液管
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0.02ml
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0.2%
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10ml容量瓶
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0.02ml
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0.2%
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50ml容量瓶
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0.05ml
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0.1%
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100ml容量瓶
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0.1ml
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0.1%
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200ml容量瓶
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0.15ml
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0.075%
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500ml容量瓶
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0.25ml
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0.05%
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因此，各步误差的总和（以最大误差来统计）：
0.7%+0.2%+0.7%+0.2%=1.8%
0.3%+0.1%+0.3%+0.1%=0.8%
0.2%+0.1%+0.2%+0.1%=0.6%
0.7%+0.1%=0.8%
0.5%+0.075%=0.575%
0.3%+0.05%=0.35%
答案：f（从最准确的角度分析）
2）在滴定分析中，一般滴定管读数有±0.01ml 的绝对误差，同时一次滴定需要读数两次，因此可能造成的最大误差是±0.02ml。为使滴定读数的相对误差≤0.1％，那么消耗滴定剂的体积就需要≥20ml。
最后，我们再举个例子来说下计算方法对于准确度的影响。
如下图所示，当有关物质方法中杂质的相对响应因子（RRF）远小于1时，若我们计算结果不进行校正，直接采用主峰的线性来计算（如面积百分比计算），那么杂质的检测结果就会比实际含量低，导致杂质被低估。
关于计算方式的选择，这里我们简单地补充两点：
对于是采用面积归一法还是自身稀释对照法，通常是在方法开发阶段将供试品稀释100倍来看下稀释后的溶液与原溶液是否成线性。若是，则可以用面积归一法；若不是，则建议使用自身对照法。
对于是采用单点外标还是标准曲线法外标，主要是计算标准曲线的截距。若无明显截距（通常为不大于10%），则可以使用单点外标；若有明显截距，则建议使用标准曲线法。
此处需要特别说明的一点就是：验证过程中回收率计算方法应与检验方法一致。也就是说，如果检验方法中规定的是外标法，那么回收率计算时应采用外标法；如果检验方法中采用的是自身稀释对照法，则回收率计算时应采用自身稀释对照法；如果检验方法规定的是主成分外标法（个人比较推荐的方法），那么回收率计算时就应采用主成分外标法。否则，一律都按照外标法来计算回收率是没有意义的。
最后，我们再说下做法和要求（参考中国药典9101 分析方法验证指导原则）：
1、精密度：
做法：
在规定范围内，取同一浓度（分析方法拟定的样品测定浓度，相当于100%浓度水平）的供试品，用至少6 份的测定结果进行评价;
设计至少3 种不同浓度，每种浓度分别制备至少3 份供试品溶液进行测定，用至少9 份样品的测定结果进行评价。
注意的是：采用第二种方法进行评价时，浓度的设定应考虑样品的浓度范围。
要求：
精密度的结果应报告标准偏差、相对标准偏差或置信区间。样品中待测定成分含量和精密度RSD可接受范围参考表3。
在基质复杂、组分含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度限度可适当放宽。对于这个指导原则中的可接受标准，本文不做过多评论。但建议的是在国内申报时，大家还是能做到就尽量去做到。
2、准确度
做法：
在规定范围内，取同一浓度(相当于100%浓度水平)的供试品，用至少6份样品的测定结果进行评价;
设计至少 3 种不同浓度，每种浓度分别制备至少3份供试品溶液进行测定，用至少9份样品的测定结果进行评价，且浓度的设定应考虑样品的浓度范围。两种方法的选定应考虑分析的目的和样品的浓度范围。
同时，由于准确度一般用回收率来表示，我们以原料药的含量和有关物质为例来说下回收率的做法。
1）含量测定方法的准确度---直接回收率
原料药含量测定时，由于目标物通常为纯物质，可以直接用已知纯度的对照品或供试品进行测定，直接计算回收率=测得值/实际值，或用所测定结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。当原料药为多组分时，也可以使用加标回收率来测定。
原料药的含量，线性范围一般为实际测定浓度的 80%~120%，其目的是考虑到这一范围足够可以满足《药典》中规定“约” 的定义为 90%~110%的范围;
2）有关物质测定方法的准确度---加标回收率
原料药有关物质测定时，主要需考察基质或其它物质的相互干扰，因此可向原料药中加入已知量的杂质对照品进行测定，计算回收率=（测得量-样品中的量）/加入量。如不能得到杂质对照品，可用所建立的方法与另一成熟方法(如药典标准方法或经过验证的方法)的测定结果进行比较。
有关物质的测定，实际操作的范围应该是定量限(或报告限)至质量标准的120%以上，同时需要进行主成分线性范围的测定（最高浓度为实际测定时稀释后的浓度的120%以上，最低浓度为定量限浓度），用于校正因子的测定。
要求：
对于化学药应报告已知加入量的回收率(%)，或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或置信区间（置信度一般为95%）; 样品中待测定成分含量和回收率限度关系可参考表2。
同样的，在基质复杂、组分含量低于0.01%及多成分等分析中，回收率限度可适当放宽。
小结
文章最后，我们再次强调一下：精密度和准确度是无法通过验证来提高的，而是通过验证我们确认了精密度和准确度的大小。
