7月2日，国家药品监督管理局、国家卫生健康委发布公告，正式颁布2020年版《中国药典》，新版药典将于今年12月30日起正式实施。新版药典对环境监测、无菌检查方法、微生物检测、灭菌验证等都做出了相关要求。本文结合了《医疗器械无菌试验检查要点指南》中的检查内容，对新版《中国药典》中关于无菌检查法的要点进行了整理，供大家参考。

5、供试品处理及接种培养基 

操作时，用适宜的方法对供试品容器表面进行彻底消毒，如果供试品容器内有一定的真空度，可用适宜的无菌容器材（如带有除菌过滤器的针头）向容器内导入无菌空气，再按无菌操作启开容器取出内容物。

除另有规定外，按下列方法进行供试品处理及接种培养。

薄膜过滤法

● 一般应采用封闭式薄膜过滤器，根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。无菌检查用的滤膜孔径应不大于0.45μm 。

● 滤膜直径约为50mm, 若使用其他尺寸的滤膜，应对稀释液和冲洗液体积进行调整，并重新验证。

● 使用时，保证滤膜在过滤前后的完整性。

● 水溶性供试液过滤前，一般应先将少量的冲洗液过滤，以湿润滤膜。

● 油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。

● 为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。

● 供试液经滤膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量一般为100ml, 总冲洗量一般不超过500ml, 最高不得超过1000ml, 以避免滤膜上的微生物受损伤。

1）水溶性液体供试品 

a.取规定量，直接过滤，或混合至含不少于100ml的适宜稀释液的无菌容器中，混匀，立即过滤。

b.如供试品具有抑菌作用，需用冲洗液冲洗滤膜，冲洗次数一般不少于3次，所用的冲洗量、冲洗方法同方法适用性试验。

c.除生物制品外，一般样品冲洗后，1份滤器中加入100ml硫乙醇盐酸流体培养基，1份滤器中加入100ml胰酪大豆胨液体培养基。

d.生物制品样品冲洗后，2份滤器中加入100ml硫乙醇盐酸流体培养基，1份滤器中加入100ml胰酪大豆胨液体培养基。

2）水溶性固体和半固体供试品  

取规定量，加适宜的稀释液溶解或按标签说明复溶，然后照水溶性液体供试品项下的方法操作。

注意：“半固体供试品”为新增样品类型。

3）可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和黏性油剂供试品  

a.取规定量，混合至适量的无菌十四烷酸异丙酯中（无菌十四烷酸异丙酯的制备可采用薄膜过滤法过滤除菌，选用孔径为0. 22μm 的适宜滤膜，或其他适宜的灭菌方法），然后应剧烈振摇，使供试品充分溶解。

b.如果需要可适当加热，加热温度一般不超过40°C，最高不得超过44°C，然后趁热过滤。

c.对于仍然无法过滤的供试品，于含有适量的无菌十四烷酸异丙酯中的供试液中加入不少于100ml的适宜稀释液，充分振摇萃取，静置，取下层水相作为供试液过滤。

d.过滤后，冲洗及接种培养基按照非水溶性制剂供试品项下的方法操作。

4）具有导管的医疗器械（输血、输液袋等）供试品 

a.除另有规定外，取规定量，每个最小包装用适量的（通常50~100ml) 冲洗液分别冲洗内壁，收集冲洗液于无菌容器中，然后照水溶性液体供试品项下方法操作。

b.同时应采用适宜的方法对包装中所配带的针头等要求无菌的部件进行无菌检查。