丙烯酰胺是一种不饱和脂肪酸，常见于高温油炸或烘烤淀粉类食品中，如薯条、油条。欧盟食品安全局经过评估发现，欧洲民众从油炸马铃薯、咖啡以及饼干等谷物食品中摄取了最多的丙烯酰胺。由于丙烯酰胺具有潜在的神经毒性、遗传毒性和致癌性，因此食品中丙烯酰胺的污染引起了国际社会和各国政府的高度关注。

安谱实验根据标准GB5009.204-2014，使用CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱采用高效液相色谱方法，重点对复杂基质饼干和咖啡中丙烯酰胺进行检测。该方法简单易行，回收率数据良好，分别为84%、92%。

样品前处理

饼干基质：

1、取粉碎好的饼干1g 于15ml 的离心管中，准确加入10ml 甲醇，涡旋混合2min，4000rpm 离心1min；

2、将上清液转移至50ml 离心管中，残渣按照步骤（1）重复提取一次；

3、合并两次提取液，再向提取液中加入20ml 正己烷，剧烈振荡1min；

4、除去正己烷层，再向下层清液中加入10ml 正己烷，剧烈振摇1min；

5、将下层清液转移至烧瓶中，加入4ml 水，混匀；

6、40 度减压旋蒸至小于2ml，待净化。

咖啡基质：

1、取1g 咖啡粉于15ml 的离心管中，准确加入10ml 乙腈，涡旋混合2min，4000rpm 离心1min；

2、将上清液转移至50ml 离心管中，残渣按照步骤（1）重复提取一次；

3、合并两次提取液，再向提取液中加入20ml 正己烷，剧烈振荡2min；

4、除去正己烷层，再向下层清液中加入20ml 正己烷，剧烈振摇2min；

5、将下层清液转移至烧瓶中，加入4ml 水，混匀；

6、40 度减压旋蒸至小于2ml，待净化。

小柱操作

小柱：SBEQ-CA3181 CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱 150mg， 6mL

 活化：6ml 甲醇

 平衡：6ml 水

 上样： 待净化样液

 洗脱：2*3ml 水( 方法：加入3mL 水于烧瓶中，多次润洗后加到小柱上，重复以上操作一次)

 合并收集上样和洗脱液，用水定容至10ml，过0.45um 亲水PTFE后进行HPLC 分析。

 HPLC 测定条件