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嘉峪检测网 2020-01-02 10:40
对于每一个身经百柱的实验人员来说,液相色谱图是他们打开未知物质世界的大门,科研中的很多问题都能从色谱图中得到很好的反映,有些问题可以通过改变设备参数得到解决,而有些问题则必须通过修改操作程序来解决,毕竟,正确选择色谱柱和流动相才是得到好的色谱图的关键。
在此根据大家实践中可能会经常遇到的一些图谱问题进行了整理汇总,大家一起来看一下吧。
4、流动相PH值选择错误:如某PH下有的样品存在分子型和离子型的动态平衡,离子型的陆续向分子型转化就会表现出拖尾。调节PH值可抑制分子解离,改善拖尾,对于碱性化合物,相对较低的PH值更有利于得到对称峰。
2、前沿峰
4、在大峰前有小峰出现,假象前沿峰,即大峰前包埋了没有分开的小峰。调整流动相洗脱梯度。
3、倒峰
1、样品折射率小:示差折光检测器测的信号是折射率,出现倒峰的原因是组分的折射率小于流动相。
2、密度的原因:密度不一样,出来的峰正倒不一样。
3、进样所致:进样时,样品对原有流动相产生瞬间阻断,然后瞬间涌流,所以产生先倒后高的“溶剂峰”。
4、基本不可避免:试着使用与流动相相同的溶剂作为溶样溶剂,另外进样之前注意平衡跟冲洗参比池。倒峰基本上不能避免,但是这样操作会小些。
4、包裹
1、色谱柱问题:色谱柱流失,柱子被污染。
2、样品溶解度差:温度可能会影响到溶解度。
5、样品中有强保留的物质:以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
7、基线噪音
5、在同一条线上有其他电子设备(偶然噪声):断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。采用精密级稳压电源。
1、流动相梯度洗脱设置不合理:优化梯度洗脱程序。
2、流动相污染或变质(引起保留时间变化):重新配置流动相。
3、保护柱或分析柱阻塞:去掉保护柱进行分析,如果必要则更换保护柱;如果分析柱阻塞,可进行反冲;如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的再生程序;如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱柱。
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