本文主要介绍了生物梅里埃法国股份有限公司 研发的医疗器械“头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）”的临床前研发实验。

一、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的产品主要组成成分

由头孢他啶（MIC 范围：0.016-256 µg/mL）和阿维巴坦（4 µg/mL）组成的药敏条。

二、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的产品预期用途

本产品用于定量检测头孢他啶/阿维巴坦对革兰阴性需氧菌的最低抑菌浓度。 

本产品含预先设定好的抗生素浓度梯度，用于检测抗生素对琼脂培养基上过夜培养后的微生物的最低抑菌浓度 

（MIC）。 

根据 EMA 和／或 FDA 对该抗菌药物的标示，头孢他啶／阿维巴坦（Ceftazidime/Avibactam）对下列革兰氏阴性需氧菌有活性。 

在体外和临床感染中都有活性： 

Citrobacter freundii 弗氏柠檬酸杆菌 

Enterobacter cloacae 阴沟肠杆菌 

Escherichia coli 大肠埃希菌 

Klebsiella oxytoca 产酸克雷伯菌 

Klebsiella pneumoniae 肺炎克雷伯菌 

Proteus mirabilis 奇异变形杆菌

Serratia marcescens 粘质沙雷氏菌 

Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌 

以下体外数据可用，但临床意义尚不明确： 

Citrobacter koseri 克氏柠檬酸杆菌 

Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌 

Morganella morganii 摩氏摩根菌 

Providencia rettgeri 雷氏普罗威登斯菌 

Providencia stuartii 斯氏普罗威登斯菌 

Proteus vulgaris 普通变形杆菌

三、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的产品包装规格

30 条/盒 

四、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的产品检验原理

头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）（后面简称“Etest CZA 药敏条”），是一种纤薄惰性材质的无孔塑料条，用于确定细菌对抗菌药物敏感性。其一侧（A）是 MIC 读数标尺(μg/mL），另一侧（B）是预先设定好的抗生素浓度梯度。 

将 Etest CZA 药敏条应用至接种过的琼脂表面时，预成型的抗生素梯度立即转移到琼脂基质中，然后直接在 Etest CZA 药敏条下方形成连续、呈指数梯度的抗生素浓度。培养期间可见细菌生长并出现一个以 Etest CZA 药敏条为中心、两边对称的抑菌圈。在细菌生长完全被抑制的地方，即抑菌圈尖端与 Etest CZA 药敏条的相交处，从刻度上读取 MIC 值（µg/mL）。 

虽然 Etest CZA 药敏条的操作过程与纸片扩散法类似，例如，接种物的准备、琼脂培养基和培养条件的选择，但 Etest CZA 药敏条并不是一种（纸片）扩散法，与传统的纸片法在概念上完全不同。Etest CZA 药敏条的抗菌药物浓度梯度是预成型、预先设定好且不依赖于扩散。 

六、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的主要原材料的选择 

本产品的主要原材料包括抗生素头孢他啶和阿维巴坦，这些原材料均是通过外购的方式获得。生物梅里埃制定了主要原材料的技术要求和质量标准并经检验合格。 

七、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的质控设置情况 

产品说明书列出了质控菌株和 MIC 质控范围，用于确认试剂和检测程序是否符合要求。质控菌株均为 CLSI 推荐的ATCC 菌株，包括大肠埃希菌 ATCC 25922、大肠埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 和铜绿假单胞菌 ATCC 27853。 

八、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的分析性能评估研究

本产品分析性能评估内容包括精密度研究和质控菌株检测的准确性研究。生物梅里埃提交了有效运行的质量管理体系下生产的三批产品性能评估资料。 

在精密度研究中，生物梅里埃使用三批产品对 30 株分离株进行检测，包括 22 株肠杆菌科细菌和 8 株铜绿假单胞菌。 

考虑不同天数、不同操作者等因素，每个批次每个菌株进行27 次检测，得到每批 810 个检测结果，三个批次共 2430 个检测结果。三个批次的重现性分别为 99.63%，99.75%和 98.64%，整体重现性结果为 99.5%，符合重现性不低于 95%的可接受标准。 

在质控菌株检测的准确性研究中，使用三批产品在精密度研究的每个检测日对 5 株 CLSI 推荐的质控菌株（大肠埃希菌 ATCC 25922、大肠埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌ATCC 700603 、铜绿假单胞菌 ATCC 27853 和金黄色葡萄菌ATCC 29213）进行检测。全部质控菌株的检测结果均在 CLSI 规定的范围内，且试验日间所有质控菌株的检测结果的变化范围在±1/2 稀释度（常规对倍稀释之间）范围内。 

采用 CLSI 推荐的微量肉汤稀释法作为参考方法，比较研究头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）对临床分离株的检测结果。微量肉汤稀释法依据 CLSI M07-A10 推荐的方法制备。境外临床研究共收集了1239 个临床分离株，包括 1087 株肠杆菌科细菌和 152 株铜绿假单胞菌。其中 1087 株肠杆菌科细菌包括弗氏柠檬酸杆菌、克氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、摩氏摩根菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌和粘质沙雷菌。 

本产品检测肠杆菌科细菌的分类一致率为 99.8%（EUCAST 折点）和 99.6%（FDA 折点），基本一致率为 99.1% （EUCAST 折点或 FDA 折点）；检测铜绿假单胞菌的分类一 致率和基本一致率均为 99.3%（EUCAST 折点或 FDA 折点）。 

检测结果均符合可接受标准。 

九、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的阳性判断值研究 

依据 EUCAST 折点或 FDA 折点进行药敏结果(敏感或耐药)的判读，设置本产品的 MIC 值。对于肠杆菌和铜绿假单胞菌，敏感折点均为≤8/4 µg/mL（EUCAST 折点或 FDA 折点），耐药折点为>8/4 µg/mL（EUCAST 折点）或≥16/4 µg/mL（FDA 折点），没有中介折点。 

十、头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）的稳定性研究 

货架效期稳定性：采用三批试剂进行研究，试剂保存在2-8℃条件下，分别于保存第 0 个月、第 6 个月、第 9 个月、第 12 个月、第 13 个月、第 15 个月、第 19 个月、第 24 个月和第 27 个月时取出试剂进行检测。检测了 5 种 ATCC 菌株，包括大肠埃希菌 ATCC 25922、大肠埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 和铜绿假单胞菌 ATCC 27853和金黄色葡萄菌 ATCC 29213。检测结果均符合可接受标准（CLSI 规定的范围内）。因此，确定产品在 2-8℃储存条件下，可稳定保存 24 个月。