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生物制品中常见细菌内毒素干扰原因分析

嘉峪检测网        2023-04-20 18:11

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的脂多糖类物质,它具有高致热性。
 
细菌内毒素是自然界中最主要且最不易被灭活的热原物质。
 
目前生物制药企业从原辅料,包材,原液,半成品和成品等各个环节,都加强对细菌内毒素的控制。生物制药企业中的原液,半成品和成品中,普遍含有各种盐类(磷酸盐等),抗体成分,铝佐剂等对细菌内毒素检测产生干扰。
 
 
干扰试验其本质是比较鲎试剂与内毒素在水溶液和供试品溶液中反应的差异,即探究供试品溶液对于内毒素检查有无干扰作用,目的是确定稀释后或处理后的供试品溶液对内毒素和鲎试剂的反应不存在干扰作用,以确定方法的适用性。
 
《中国药典》2020版中对细菌内毒素的检查有着明确的规定,当进行新药的内毒素检查试验前,或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时,须进行干扰试验。
 
一项对人用药品与鲎试验相容性的研究证实了干扰的影响范围,在所研究的品种中仅30%的样品可以不经任何处理直接进行内毒素检测,有70%的样品都是存在干扰的。细菌内毒素试验中如出现干扰现象,可通过适当的处置来去除干扰。
 
常规测试中,将样品进行小于MVD的稀释可以解决97%的干扰问题,然而对于某些样品,单纯的通过稀释无法很好地去除干扰,需要通过一些别的方式来去除干扰,例如调节样品PH值、使用含Mg2+或Ca2+离子的稀释剂稀释样品、加热、充分涡旋、使用内毒素分散剂稀释样品、彻底清洗器具等。
 
干扰的类型分为抑制和增强两种。
 
抑制是指供试品中含有的内毒素浓度≥2倍检测试剂的灵敏度,但检测结果仍为阴性。
 
增强是指供试品含有的内毒素浓度低于检测试剂灵敏度的1/2,但检测结果仍为阳性。
 
常见的干扰和排除的方法可以参考下表:
注:参考安度斯相关资料及中国药典分析检测技术指南2017版。
 

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