培养基灭菌是否彻底直接影响实验数据,影响培养基灭菌的因素有很多, 除了培养基内杂菌的种类和数量,还与灭菌时间和温度的选择等因素有关。今天小编与大家一起分享影响培养基灭菌的主要因素。
1、培养基灭菌的定义
物理或化学方法从培养基中杀灭有生活能力的细菌营养体及其孢子,或从中将其除去。
2、培养基灭菌的目的
杀灭培养基中的微生物,为后续发酵过程创造无菌的条件。
3、培养基灭菌的要求
1、达到要求的无菌程度——10-3
2、尽量减少营养成分的破坏
4、培养基灭菌的方法
1、化学灭菌
2、过滤灭菌
3、湿热灭菌
5、培养基灭菌温度的选择
1、应考虑微生物的热致死温度(应高于该温度,一般以芽孢为准);
2、在保证灭菌效果的前提下,尽可能减少培养基中的营养成份的破坏;
3、遵循培养基厂家建议。
6、影响培养基灭菌的主要因素
1、培养基成分
油脂、糖类及蛋白质等组成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜从而影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。一般糖类含量较多的时候最好选用115℃/30 分钟;一般的培养基可选择 121℃/20 分钟。
2、pH值
pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值在6.0~8.0 时,微生物最不易死亡。pH值6.0时,微生物比较容易死亡,此时pH很容易渗入微生物的细胞,从而改变细胞的生理反应,促使其死亡。所以培养基的pH越低,所需的时间也越短。
3、培养基中颗粒
颗粒小,容易灭菌,颗粒大,则难灭菌。培养基结块会造成培养基灭菌的不彻底。
4、泡沫
泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死其中的杂菌,从而影响培养基灭菌效果。
5、灭菌器内冷空气是否排净
高压蒸汽灭菌器在使用时,冷空气排除干净,才能达到饱和蒸汽。当水蒸气中含有空气时,压力表上所示的压力不是水蒸气的实际压力,而是水蒸气压力和空气压力的和。相同的压力下,含空气的蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度,所以当灭菌器加热达到需要的灭菌压力时,如果含有空气,灭菌器内达不到所需的灭菌温度,就达不到应有的灭菌效果。