本期有小伙伴提问：怎样培养细胞才能使其避免被细菌污染，又可以保证其处于5%二氧化碳环境呢？

细胞培养的成功与否直接影响着实验结果的可靠性。通过get一些简单而有效的小窍门，我们可以减少细胞在培养过程中被污染的风险，保证细胞健康生长。

一、  无菌操作和器具清洁

无菌操作和良好的清洁习惯，是细胞培养中非常重要的一环。在进行任何操作前，我们都要确保在无菌条件下进行。细胞培养时所用的器皿，包括培养瓶、培养皿等等，都要对着酒精灯的火焰打开开口，以减少细菌的进入。细胞培养使用的试剂，在酒精擦拭试剂储存器皿后带入超净台，同时要尽量避免试剂与试剂之间的交叉污染。另外，定期清洁和消毒培养箱、培养室和工作台等区域也是非常重要的。

二、  定期更换培养基

定期更换培养基是维持细胞健康生长的关键之一。新鲜的培养基可以提供细胞生长所需的营养物质，同时也可以减少细菌等污染物的积累。定期更换培养基有助于保持培养环境的清洁和稳定，帮助维持细胞的健康生长状态。

三、避免过度开启培养箱

在细胞培养的过程中应尽量少开培养箱，这样能保持环境稳定，减少细菌进入的风险。另外，将细胞从培养箱中取出进行操作时，确实应该尽量减少操作时间，以避免细胞受到外界环境的不利影响。长时间暴露在室温条件下，可能会导致细胞受到温度变化和二氧化碳浓度变化的影响，从而影响细胞的状态和生存能力。

四、加入适量的NaHCO3

在细胞培养过程中，维持适当的CO2浓度对于细胞生长和繁殖是非常重要的，CO2浓度与维持培养液的pH有直接关系。随着CO2释放量增多，培养基会变酸，我们可以通过添加适量的NaHCO3，来帮助调节培养基中的CO2浓度，从而维持合适的pH值。如果培养箱中CO2的浓度设定在5%，那么我们通常需要向培养液中加入1.97 g/L的NaHCO3。