【问】HPLC柱前衍生和柱后衍生的相关问题？1）为什么要衍生？2）衍生化的分类？3）进行衍生，适用的化合物有哪些？4）进行衍生化的要求有哪些？5）柱前衍生和柱后衍生的优缺点？

【答】色谱技术中的化学衍生法系指在色谱过程中用特殊的化学试剂（一般称为衍生化试剂或标记试剂）使样品成分转变相应的衍生物之后进行分离检测或进行检测的方法。目的为：1．将紫外—可见强吸收功能基团引入被检测对象或将其转变为荧光衍生物，以提高检测灵敏度；2提高对分析样品的分离和选择性。

从是否与HPLC系统联机的角度，化学衍生法分为在线on line）与离线∣Off line）两种。从发生衍生化的场合，分为柱前衍生法pre-columnderivatization）与柱后衍生法（post-columnderivatization）两种。目前，在HPLC中，以离线的柱前衍生法（简称柱前衍生法）与在线的柱后衍生法（简称柱后衍生法）使用居多。