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聚合酶链反应(PCR)简述

嘉峪检测网        2017-08-08 09:20

一、PCR概念
 
  聚合酶链反应(基因扩增):基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。
 
二、PCR的应用领域
 
  1、遗传病和某些疑难病的诊断
 
  2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生物学、生化和免疫 学技术无法查出病原体时,可用PCR来检查。
 
  3、法医和刑侦鉴定。
 
  4、癌基因的检查。
 
  5、基因探针的制备。
 
  6、基因组测序、染色体巡视。
 
  7、cDNA库的构建。
 
  8、基因突变的分析和定位诱变。
 
  9、DNA重组。
 
  10、基因的分享和克隆。
 
三、标准的PCR过程,分为三步:
 
  1. DNA变性
 
  (90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA
 
  2. 退火
 
  (60℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。
 
  3. 延伸
 
  (70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的3′端开始以从5′??′端的方向延伸,合成与模板互补的DNA链。
 
聚合酶链反应(PCR)简述
 
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来源:AnyTesting