实验中常会用到校准曲线，但是应该如何正确使用，校准曲线进行确认呢？

关于校准曲线

使用校准曲线时应注意：校准曲线包括”标准曲线”和“工作曲线”。

应用标准溶液制作校准曲线时，如果分析步骤与样品的分析步骤相比有某些省略时，则制作的校准曲线称为标准曲线。

如果模拟被分析物质的成分，并与样品完全相同的分析处理，然后绘制的校准曲线称为工作曲线。

因此，如果基体效应对分析方法至关重要时，应使用含有与实际样品类似基体的标准溶液系列进行校准曲线的绘制。

那么，接下来到底应该怎么用校准曲线做确认呢？

几种校准曲线的确认方法

1.校准曲线工作范围确定

实验室应根据校准曲线的线性范围和样品预处后预计的浓度或含量范围确定校准曲线工作范围。

2.应在校准曲线浓度范围要求

校准曲线浓度范围均匀布置6个或以上的校准标准点（包括空白或一个低浓度标准点）。不同浓度点的校准标准要单独配制，不能通过稀释同一母液获得。由此得到的相关系数r应不小于0.997。

3.校准标准每个浓度点测试次数

至少要重复测定2次，建议3次或更多，检测顺序随机确定。

4.检查校准曲线各浓度点的标准偏差与浓度的关系

若标准偏差为一常数，则为直线回归;若偏差与各浓度点的浓度成线性相关，则为加权直线回归。

5.校准和线性度的评估方法

校准和线性度的评估有多种方法，具体选择哪种方法，视具体情况而定。

6.确定校准曲线是否稳定

需要在不同时间，制作同一条曲线的重复性。

7.单点校正

当目标组分含量或浓度在工作曲线工作范围内时，可使用单点校正，但应研究单点校正范围。

8.对标准方法进行线性及校准验证需要满足的要求

a）在方法（非标或者标准方法）规定的工作范围内确定校准曲线的各个浓度点。浓度点个数应满足第2点的要求（曲线浓度点的要求），最低浓度校准点应远离检出限位于定量限附近，中间点为目标分析物日常检测平均浓度水平，最高校准点浓度为工作范围的最高点或接近最高点;

b）如果实验室经过技术判断，认为按照a）中的要求还不能实现验证的目的，可参照第9点的要求，实施进一步的验证。

9.对非标准方法线性及校准进行确认需要满足的要求

a）实验室用有证标准样品，采用比较检测法检测样品中目标组分含量时，应研究线性度及其对检测结果的影响；

b）线性度及其对检测结果影响的研究内容包括:线性范围、工作范围、校准函数拟合及检验、校准曲线核查、单点校正可行性及单点校正范围研究；

c）如果不能确定目标组分含量与仪器信号的关系，可以按照GB/T22554《基于标准样品的线性校准》给出的方法进行校准函数参数估计及检验；

d）在完成线性范围、工作范围、校准函数拟合及检验的基础上获得的校准直线还应满足第8点a)的要求；

e）如果一条校准曲线在最低浓度到最高浓度范围内不能满足相关要求，可考虑分多段制作校准曲线。

10.对校准曲线每个点进行显著性检验

校准曲线质量检验，需要对校准曲线每个点的结果进行检验，只有经过显著性检验没有显著性差异的点的结果才能作为校准曲线的值。若出现有显著性差异的点，应检查分析系统，进行原因分析，采取纠正措施消除影响因素后重新制作校准曲线。如果要求校准曲线通过0点，还应进行是否通过0点的检验。

思考

方法验证或者方法确认中，如果需要做校准曲线的验证，您该怎么做？欢迎留言说出您的观点~