1 杂质的分类和存在的问题 

任何影响药物纯度的物质统称为杂质。在药物研发中杂质的研究贯穿其整个阶段，是保证药品质 量的重要内容。药品中的杂质分类通常有四种方法：

 ①按理化性质分类 ：有机杂质、无机杂质及残 留溶剂。

 ②按来源分类：工艺杂质 ( 包括合成中未反应 完全的反应物及试剂、中间体、副产物等 )、降解 产物、从反应物及试剂中混入的杂质等。 

③按毒性分类 ：毒性杂质和普通杂质等。 

④按化学结构分类 ：其它甾体、其它生物碱、 几何异构体、光学异构体和聚合物等。 杂质的存在对药物的安全性和有效性有很大 的影响，如何制定杂质的限度也是药物研发过程中 一个非常敏感的问题。目前国内在药物杂质研究中 存在的主要问题是“杂质限度制订的依据不充分”。

 研制单位通常是根据多批样品的研究结果确定，或凭所谓的“经验”制订。特别是方法学研究不全面， 没有对杂质进行有效地分析，并进行定性研究，导 致杂质研究不完善，成品与国外产品的质量差别较大。

 本文重点对药品中有机杂质限度的制订方法进行了讨论。

2 一般要求 

药品的开发需遵循三个原则 ：安全、有效和质量可控。因此，在制订质量标准中杂质的限度时， 首先应从安全性和有效性方面考虑，尤其对具有药理活性或毒性的杂质，要严格控制其限度。其次， 应考虑生产的可行性及批与批之间的正常波动，以及药物本身的稳定性。在保证安全和有效的前提下， 根据工艺的波动情况制定合理的限度。此外，在药 物研发过程中不同药物或者同一药物在不同研究阶 段的侧重点是不一样的。因此，其杂质研究也各具特点，需要根据这些具体情况分别对待。

 通常，可以根据药物规定的剂量确定降解产物的报告阈值、鉴定阈值和界定阈值，以此来确定杂质的限度。另外，亦可通过已知杂质的毒性数据， 或其毒性研究结果来确定杂质的限度。

2.1 ICH的一般要求

在确定了药物的剂量后，可以根据降解产物的阈值来制订杂质的限度。此时，可参照 ICH( 人用 药品注册技术要求国际协调会 ) 的相关要求制订杂质限度 。 如，按 ICH要求，对于新的原料药，每日最大剂量大于 2 g时，单个杂质的界定阈值为 0.05％ ； 每日最大剂量不大于 2 g时杂质的界定阈值 0.1％ 或 1 mg( 按严格的要求定 )。当一个原料药的每日 最大剂量为 1.5 g 时，如按界定阈值 0.1％计，则 杂质的绝对摄入量为 1.5 g×0.1％ =1.5 mg，大于界定阈值 1 mg ；如按阈值 1 mg 计，则杂质的限度值 为 1 mg÷1.5 g×100％ =0.07％，与界定阈值 (0.1％ ) 不一致。在这种情况下，制订杂质限度的原则是“按严格的要求定”，即杂质限度应订为 0.07％。 

当然ICH只是一般的要求，对于特殊杂质 ( 具 有一定活性 ) 或杂质限度超出ICH的要求时，应进行相关的安全性研究或根据文献数据，以判断限度的合理性。

2.2 已知杂质化合物的毒性数据

对于已知杂质化合物，可参考相关的文献，或 一些数据库 ( 如 www.discoveryGate.com 网站 ) 查得其毒性数据，并根据药品临床拟用的剂量推算药 物的安全限度。

 比如，杂质苯肼的临床主要毒性反应为急性血管内出血，内脏器官损害包括肝、肾、心、骨髓和中枢神经系统等的多发性损害，高浓度还可引起肺组织损害 ；即使作为苯肼衍生物，也具有潜在的致癌性风险。文献显示，雄性鹌鹑静注苯肼 0.6、 6、60 mg/kg，给药后 24 h 和 72 h 均产生明显的溶血反应，并伴有淋巴细胞增多、单核细胞减少和嗜酸性细胞减少。

因此，对于某些药物中的苯肼杂质， 应进行必要的控制。人体试验或用药中的苯肼总量 应不高于0.05 mg/kg。若人体最大用药剂量为2 g时， 产品中如含有该杂质，按人体重 60 kg 计，其限度值为 0.05 mg/kg×60 kg÷2

g×100％ =0.15％。 

2.3 根据安全性的研究结果推算

对于没有安全性数据的杂质，需要进行安全性试验，然后根据杂质的NOAEL( 未观察到毒性反应的剂量水平，no adverse effect level) 数据进行推 算。

一般情况可采用以下方法 ： ①对单个杂质进行毒理学研究，确定其NOAEL， 制订该杂质的限度。如，某创新药临床前试验样品中杂质A的限 度为 0.34％，每天的最大用量拟定为 10 mg。其临床研究用药，申报单位将杂质 A 限度确定为 0.5％。 这一限度不但超过了 ICH Q3 规定的常规杂质限量 标准 ( 0.1％ )，也超过了临床前试验样品中杂质 A 0.34％的限度。

因此，在该品种的审评中，药审中心建议提供该杂质限度确定的依据。研究者对此进行了说明，其推算过程如下 ：该药在大鼠重 复给药 6 个月的毒性试验中，无毒性反应剂量为 26.5 mg·kg-1·d-1，则杂质 A 的实际用量为 26.5× 0.34％ =0.09 mg·kg-1·d-1。通过动物类比法转换为 0.09 mg·kg-1·d-1×6=0.54 mg·/m-2·d-1( 大鼠在人体中 mg/kg 剂量的转换因子为 6)，再用 FDA 转换标准 ( 人体中 mg/kg 与 mg/m2 的转换因子为 37)，得出相当于 60 kg 的人体耐受杂质 A 的量为 0.54×60÷ 37=0.88 mg/d。考虑到该新药在临床研究中的最大 给药剂量为 10 mg，若按 0.5％的杂质含量计算， 每日的杂质 A 最大剂量为 0.05 mg/d，仅为杂质 A 无毒性反应剂量 0.88 mg/d 的 1/17，因此杂质 A 的限度订为 0.5％是可行的。

 ②根据毒理学实验样品杂质含量情况进行推算，制订出杂质的限度如，某个药物口服给药的每日最大剂量为 60 mg，相当于一个体重 60 kg 的人给药剂量为 1mg/ kg。在 13 周犬的口服给药毒理学研究中，确定其 NOAEL 为 2 mg/kg。根据该批样品中杂质 A 的含 量为 0.1％计算，杂质 A 最大安全性限度为 2 mg/ kg×0.1％ =2 µg/kg，换算到人体的杂质 A 安全剂量 约为 1µg/kg( 犬在人体中 mg/kg 剂量的转换因子为 1.8)，则杂质 A 的限度为 1 µg/kg÷1 mg/kg×100％ =0.1％。 以上方法只是一个参考，研究者可根据研究结果综合考虑，选择合理的方法，制定科学、合理的 杂质限度，当然不同类别的药物杂质限度的研究有所不同。

3 对创新药物的要求 

如前述，药物在不同研究阶段的侧重点是不一 样的，其杂质研究也各具特点。对于创新药物而言， 其研发是一个长期、复杂的过程，在这个过程中， 随着对化合物的药理、毒理作用和药效等方面研究 的不断深入，研发者会对目标化合物的药用前景不断进行评价和评估，因此在不同的开发阶段对杂质的研究要求也各不相同。

 3.1 研发初期

 在药物研发初期 ( 一般情况在临床研究Ⅱ a 以前 )，由于对拟开发化合物的前景不明确，原 料药的制备工艺、制剂的处方尚不能最后确定， 且化合物的制备规模也不会太大。因此在进行 CMC(chemical manufacture and control) 的研究时， 主要目的是结合药理毒理的研究结果，保证目标化合物的安全性，同时保证目标化合物的质量基本可控。在此期间，根据临床研究的需要，药物的剂型、 处方工艺、规格等均可能发生变更，因此，该阶段 一般采用“通用”的方法 ( 一般可根据药典的常规 要求 )，质量的控制项目采用常规的控制项目 ( 药 典的常规要求 )，目的是保证化合物质量的基本可控和工艺稳定性 ( 质量一致 )，其杂质限度的制订可根据药理毒理的研究结果，只要保证杂质在安全 范围内即可。

 3.2 研发的中、后期 

在研发中、后期 ( 一般情况下在临床研究Ⅱ b 以后 )，药物的工艺、剂型和处方已基本确定，样品的产量亦已放大至一定规模，在保证安全性的前提下，可结合大规模生产、成本、稳定性等方面的要求，综合考虑制订一个合理的限度，并对相关的杂质进行定性。原则上，质量标准中杂质的限度， 应不低于 ICH 的一般要求。

某一个创新药杂质在不同研发时期的限度见表 1

上述数据说明 ：①在药物研发的初期，临床样 品的杂质水平不应超过毒理学样品的杂质水平，单 个杂质一般不需要定性。②在研发后期，产品的开发前景已经明确，需要对这些杂质的结构进行确证， 并进行详细的方法学研究，包括对每一个杂质的专属性、灵敏度等的研究。特别是在研发后期，随着生产工艺的优化，规模化样品批产量的质量明显提 高，研究者根据实际情况，最终确定了杂质的限度： 按外标法以峰面积计算，杂质 A、B、C 均不得过 0.2％，有关物质总量不得过 1％ ( 一般不得过根据 药品临床用剂量推算的药物安全限度 )。

4 对仿制药物的要求 

4.1 仿制国内已上市的药物 ( 已有国家标准 )

 这类药物有关物质的限度，主要根据国家标准制订，同时可参考技术先进国家药典的收载情况或 国外产品标准，再结合药物工艺和处方进行必要的研究后制订。

 在仿制这类药物时，首先应考虑到国家标准也 需要提高这个问题。特别是上市时间不长的品种， 实际上生产单位在批准生产后有一个逐步完善大生 产工艺、提高和稳定成品质量的过程，即存在着生产单位提出补充申请以修订质量标准的可能。如果被仿制药物已同时被技术先进国家的药典 ( 如美国 药典或欧洲药典 ) 收载了，则应该进行相关的比较。 应注意的是，方法和限度是相对应的，不同的方法对应的限度可能不一致。因此，有关物质检查的方法如果不一样，需要对不同的方法进行互相比较研 究，考察方法的适用性。应特别注意不同方法检出的杂质数量和含量，如有新的杂质产生，其限度的制定可参考前述的方法。

 如，抗肿瘤药奥沙利铂 (oxaliplatin)，目前国家标准的杂质检查方法相对粗糙，没有对单个杂质进行定性和检查，而且限度的依据不充分，其国家标准需要提高。从奥沙利铂的结构特点分析，可能存在的杂质较多，如草酸、双水合二氨环己烷铂及 其二聚物、二羟合奥沙利铂等，这些杂质需要采用不同条件的 HPLC 方法才能有效地检出。因此研究中在确认了方法的可行性后，可参照技术先进国家药典标准执行，杂质限度亦照此制订。

4.2 仿制国外上市的药物 ( 国内没有上市，没有国 家标准 )

 这类药物杂质限度的制订比较复杂，如果能查到国外上市药物的标准情况，杂质限度的制订即可以参照执行。如果没有这方面的数据，需要根据前述的杂质限度制定要求，在进行相关的研究后，再制定合理的限度。 如氯法拉滨 (clofarabine)，一种用于治疗儿童 急性粒细胞性白血病的药物，国外已经上市。国内的一些申报单位在仿制该药时，存在有关物质限度不一的问题。有的根据经验确定，有的是根据多批样品的检验结果确定，限度制订的依据不充分。因此在审评过程中，药审中心均给这些研制单位下发了资料补充通知，要求说明有关物质限度的制订依据，并对大于 0.1％的杂质进行深入的研究。

5 结语 

杂质的研究是一个复杂的过程，是药物研发中 一个非常重要的环节，是保证药物质量的关键，如何进行杂质研究、限度如何制定以及不同阶段的研 究策略，不同的研发企业有不同的操作方法，但是方法的选择和限度的制定应有充分的依据，这样才能有效的控制产品的质量，以确保用药安全。