毫无疑问，医疗器械是挽救生命的重要工具。从HIV血液诊断检测、血糖自测等体外诊断IVD，到应用于监测X射线管性能的软件作为医疗器械(SaMD)，再到手持手术器械等I类医疗器械。医疗器械在改善全世界患者的健康方面发挥着重要作用，但也存在着潜在的不良风险，必须严格监管。生物相容性测试是观察医疗器械的化学组成、灭菌过程和设备接触类型与患者组织和生理系统相互作用的过程。这种测试是医疗器械安全评估的关键步骤。
2、FDA认证时，致敏性测试的重点是哪些？
致敏性依据的标准是10993-10，同样建议实验室出具符合GLP的报告，而审核员在拿到报告后会在报告中重点关注下列内容:
(一般用于510(k)申请的报告都为英文，所以为了能让大家在英文报告中找到对应内容，这里我们使用英文相关术语，避免歧义)
1.致敏性测试的类型：主要的实验类型有三种，包括Guinea Pig Maximization Test (GPMT), LLNA (per ASTM F2148), Buehler Dermal Sensitization (Per ISO 10993-10)。或者其它方法。
FDA当前推荐适用GPMT方法，也就是上述的Guinea Pig Maximization Test. 如果实验使用了其它方法，那么FDA需要提供使用其它方法的详细描述；
2. 实验样品信息：报告中需要包含用于此次实验样品的信息，比如部件名称，材料名称等；注意，需要确保试验样品为产品的最终形态，也就是和产品上市的状态保持一致，不建议提供原材料作为实验样品。
3. Extraction Conditions
a. Test Article Extraction Ratio
样品的浸提比例一般包括，6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick), 0.2 g/ml (elastomers), 0.1 g/ml (non-elastomers). 或者其它比例。
FDA当前推荐使用基于面积来浸提，也就是上述的6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick)。如果实验使用了基于重量来确定浸提比例，则需要给出合理的解释。FDA认为使用重量来代替面积可能会因为不充足的样品量而导致假阴性的结果，所以如果给出解释，那么应该重点解释基于重量确定的浸提比例而得到的样本量应该等于或优于基于面积确定的浸提比例而得到的样本量。
至于如果确定6 cm2/ml (<0.5mm thick), 3 cm2/ml (>0.5mm thick), 还是1.25 cm2/ml (elastomer >1mm thick)，那么就要根据样本的物理特征了，正如括号中备注的，小于或大于0.5mm厚度，或者带有弹性且大于1mm厚度等条件来决定。
b. Extraction Vehicle
浸提介质一般包括Polar Vehicle (0.9% Sodium chloride), Non-Polar Vehicle (Vegetable, Sesame or Cotton Seed Oil),或者其它。
FDA当前推荐使用极性(Polar Vehicle)和非极性溶剂(Non-Polar Vehicle)分别浸提。也就是上述两种浸提介质都要使用。如果使用其它浸提介质，需要给出合理的解释。
c. Extraction Conditions
浸提条件一般包括37℃ for 24 hr, 37℃ for 72 hr, 50℃ for 72 hr, 70℃ for 24 hr, 121℃ for 1 hr, 或者其它浸提条件。
FDA当前推荐使用50℃ for 72 hr, 或者70℃ for 24 hr。
如果使用37℃ for 24 hr, 或37℃ for 72 hr，则需要给说明器械的临床使用时间是否大于浸提时间。
如果使用121℃ for 1 hr，则需要给说明为什么此浸提温度对产品的浸提物不会有影响。
d. Was the test extract diluted, filtered, or was the pH adjusted?
FDA当前建议在报告中明确包含浸提液状态的描述，此描述应可以清晰的说明浸提液是否在使用前经过稀释，过滤或者调节pH值。
FDA期待的描述中，应该清楚的表明，浸提液在使用前没有经过上述处理。
e. Positive Control
FDA当前建议在报告中明确包含阳性对照的描述，此描述应该可以清晰的体现
1）Conducted concurrently with test article
2) Historical control <3 months from the time of test
3) Historical control >3 months from the time of test
4) No Positive Control
阳性对照应该是上述1）或2）的状态。
如果出现3）或4）的情况，则说明此实验不符合ISO 1033-10，Clause 4.0(d)的要求，需要重新进行测试。
f. What is the positive control?
FDA当前建议在报告中明确阳性对照是什么，DNCB(0.05-0.5%), DNCB (≥0.5%)，或者其它。
FDA当前推荐使用DNCB(0.05-0.5%)作为阳性对照。
如果使用DNCB (≥0.5%)作为阳性对照，需要对评价是否对此实验最终结果的可接受性和敏感性有影响。
如果使用其它物质作为阳性对照，则需要给出使用这种物质的合理性。
g. Negative Control
FDA当前建议在报告中明确包含阴性对照的描述，此描述应该可以清晰的体现所使用的阴性对照信息。
FDA当前推荐使用Extraction vehicles without test material only作为阴性对照，如果使用了其它的阴性对照，则需要提供合理性评价。
h. Extract/Test Article is clear?
FDA当前建议在报告中包含对浸提物质的状态进行描述，浸提介质中的测试样本是否清晰，比如不浑浊，没有颗粒，没有颜色改变，没有膨胀或者降解.
FDA期待的描述中应该如上述所列，没有这些情况出现。
i. Extract Storage Conditions
浸提溶剂的存储条件包括两种Used by 24 hrs post-extraction, 和Stored (>24 hrs)。也就是浸提后的溶剂是否在24小时内使用。
FDA当前建议浸提后的溶剂需要在24小时内使用，否则需要给出合理的解释，并提供使用存储了24小时后的浸提溶剂进行实验对结果没有影响的证据。
一般建议浸提后立即使用。
4. Methods
a. Test System
FDA当前推荐的实验细胞毒性的实验系统为≥10 Test & ≥5 Control Males and/or Females that are/were not pregnant, 注意需要注明实验中使用的雌性动物么有怀过孕。
如果不是此实验系统，则需要提供替代细胞类型的描述，并给出合理的解释。
b. Were three pairs of intradermal injections given on the backs of the animals
FDA当前建议在报告中包含对实验动物背部进行皮内注射的描述，此描述应包括必要的信息，可以让审核员清晰的判断在动物背部进行的皮内注射的方法是否符合下面的要求:
Test animals
1.Two 0.1 ml of a 1:1 FCA/vehicle mixture
2.Two 0.1 ml of test extract
3.Two 0.1 ml of a 1:1 mixture of the 1:1 FCA and text extract
Control animals
1.Two 0.1 ml of a 1:1 FCA/vehicle mixture
2.Two 0.1 ml of test extract
3.Two 0.1 ml of a 1:1 mixture of the 1:1 FCA and text extract
FDA审核员期望此部分的实验是按照上述要求实施的，如果不是，则需要给出理由。
c. On day 6 after injection
FDA当前建议在报告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在注射后第6天的实施了下列操作
Approximately 24h before Induction II, clip and treat the injection sites with a 10% sodium lauryl sulfate (SLS) in petroleum jelly (any remining SLS should be removed prior to Induction II treatment)
如果没有实施上述操作，则需要给出理由。
d. On day 7 after injection
FDA当前建议在报告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在注射后第7天的实施了下列操作:
Saturate (-0.3ml) the 2x4 cm filter paper patches with test extract or control vehicle applied to injection area for 48 hours and remove the patches after 48 hours.
如果没有实施上述操作，则需要给出理由。
e. 14 Days after removal of Induction patches
FDA当前建议在报告中包含描述，此描述可以清晰的表明是否在移除贴片后14天的实施了下列操作:
Clip the right and left flank areas of each guinea pig and saturate 2x2 cm patches/hilltop chambers with test extract or control vehicle. (One flank should be treated with patch/chamber containing the test extract, while the other flank should be treated with the control vehicle. Patches/chambers should be left in place for 24 hours before removal)
如果没有实施上述操作，则需要给出理由。
f. Were there deviations?
FDA当前建议报告中明确结果是否存在偏差，如果存在，则需要提供解释，为什么此偏差不会影响结果的有效性。
5. Results
a. Did animals appear normal, and were there any deaths?
FDA当前建议报告中明确体现实验用动物的状态，是否存在任何死亡情况。
一般来说，实验动物应该外观正常，没有死亡。如果出现不正常的外观或者死亡情况，则需要对这些不良时间进行调查，并根据调查结果评估是否影响实验结果。
b. Was the Magnusson and Kligman score < 1.0 for the polar extract in all test and control animals?
FDA当前建议报告中明确描述是否使用Magnusson and Kligman评分小于1.0来评价极性萃取和对照动物.
如果评分大于等于1，需要提供解释，为什么此评分不能说明致敏性，以及为什么此评分的对照不影响实验的有效性。
c. Was the Magnusson and Kligman score < 1.0 for the non-polar extract in all test and control animals?
FDA当前建议报告中明确描述是否使用Magnusson and Kligman评分小于1.0来评价非极性萃取和对照动物。
如果评分大于等于1，需要提供解释，为什么此评分不能说明致敏性，以及为什么此评分的对照不影响实验的有效性。
d. Were the positive controls ≥ 1.0 in all animals?
FDA当前建议报告中明确描述是否所有阳性对照的评分都是大于等于1的。如果不是，则需要提供理由。
6. Conclusion
Sensitizing Potential
FDA当前建议报告中明确关于潜在毒性的测试结论，实验结论一般应为non-Sensitizer。如果实验结论是Sensitizer，则需要给出为什么此结论可以被接受。
3、总结
同细胞毒性一样，如果提交的致敏性测试报告，包含了上述6条涉及的内容，并且也符合FDA对此项内容的预期，则FDA审核员会很快的结束致敏性的审核；如果报告包含了上述6条涉及的内容，但是其内容不符合FDA的预期，则FDA审核员会花更多时间来审核给出的解释，或要求提供解释。
总之，在提交前，甚至测试前，充分和实验室沟通，确保报告包含这些要素，并且取得符合FDA预期的结果，则致敏性的审核将会以最快的速度完成。
后续，我们会根据我们的审核经验，针对510(k)提交中各个审核要点，陆续制作一些列的内容，希望可以减少大家在510(k)审核过程中花费的事件，并尽可能的避免一些不必要的问题。
