一、目的

规范实验室查找“污染”来源的操作过程，保证查找“污染”来源的全面性和及时性。

二、适应范围

临床基因扩增检验实验室。

三、责任人

临床基因扩增检验实验室工作人员。

四、操作步骤

1. 物品准备：生理盐水（或去RNA酶水）、1.5ml EP管、EP管架、采样拭子、带滤芯枪头、扩增检测试剂盒等。

2. 查找“污染”来源的检测途径

2.1 空气沉降检测：

2.1.1 在试剂准备区、样本制备区和扩增分析区实验台面上分别放置开盖装有生理盐水（或去RNA酶水）的EP管，过夜。测试试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的空间否存在气溶胶污染。

2.1.2 在洁净工作台面、生物安全柜内部和核酸提取仪内部分别放置开盖装有生理盐水（或去RNA酶水）的EP管，过夜。测试洁净工作台、生物安全柜内部和核酸提取仪的空间是否存在气溶胶污染。

2.2 物表检测：

2.2.1 用采样拭子蘸生理盐水（或去RNA酶水）分别对试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的实验台面反复擦拭后，放入生理盐水（或去RNA酶水）中进行洗脱。测试试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的实验台面上否存在污染。

2.2.2 用采样拭子蘸生理盐水（或去RNA酶水）分别对洁净工作台面、生物安全柜台面和荧光PCR仪内壁反复擦拭后，放入生理盐水（或去RNA酶水）中进行洗脱。测试洁净工作台、生物安全柜内部、核酸提取仪和荧光PCR仪内面是否存在污染。

2.3 移液器检测：

2.3.1 将配液的移液器和加模板的移液器分别换上无滤芯枪头，在生理盐水（或去RNA酶水）中反复吹吸10次。测试移液器内部是否存在污染。

2.3.2 用采样拭子蘸生理盐水（或去RNA酶水）后分别对配液的移液器和加模板的移液器的内外表面进行取样，取样后放入生理盐水（或去RNA酶水）中进行洗脱。测试移液器表面是否存着污染。

3. 将上述采集到的样本，按照扩增检测试剂盒说明书要求的和核酸样本量，直接加入扩增试剂的八连管内，上机扩增检测。同批次扩增检测应设有阳性对照和阴性对照（排除扩增过程中的假阴性和假阳性）。

4. 结果分析：按照扩增检测试剂盒要求进行结果分析。

4.1 在阳性对照和阴性对照结果正常的情况下分析检测样本。

4.2 若发现样本中有扩增曲线，即说明该样本检测的内容存在“污染”。