一、控温引起峰面积异常

某片剂检测采用自身对照法，配制过程如下：取约1.2g加溶剂溶解并稀释至10ml作为供试品溶液。取100ul供试品溶液稀释至50ml作为自身对照溶液（0.2%）。再取1.0ml自身对照溶液稀释至10ml作为灵敏度溶液。检测过程中发现自身对照面积约为供试品面积的0.4%。以前检验过此品种，二者之间比例约为0.2%。

面积不成比例，是不是稀释倍数不对导致对照溶液面积偏大？实验人员查看以往数据发现对照溶液及灵敏度溶液面积与以前检验时的面积基本一致，供试品中面积比以前少了约一半。

什么原因导致供试品峰面积减少？样品溶液不稳定？方法已验证，在这个时间内稳定性没有问题。而且连续进样的几批样品也没有发现供试品峰面积有减小趋势。有没有可能样品配制错误？如果样品配制错误，那后续稀释的自身对照面积与以前的也对不上。试验人员也拿出称量条，的确称量质量没有错误。至此感觉也推断不出问题原因，不知该如何解决了。只能复测确认一下情况。

时间是9月份左右，调查人员拿进样瓶看看是否有什么异样。感觉样品盘很凉。

“标准中样品需要控温吗？”调查员问道。

“不需要控温，因为很多品种都需运行很长时间，为了保证不出问题，所以我们一般都会控制样品温度”实验人员回答。

考虑到这个品种供试品浓度很大，调查员立马意识到问题，于是拿起棕色进样瓶对着日光灯仔细查看，发现供试品溶液出现分层现象。再查看自身对照溶液及灵敏度溶液，均没有出现此现象。序列设置为先运行空白及自身对照溶液、灵敏度溶液，这些运行完毕需要10个小时左右，在这个过程供试品溶液逐渐完成分层。后续将样品放至室温，混匀，关闭控温之后重新运行，检测峰面积恢复正常。

乙腈和水的体系，在加入一定阈值的盐、糖或者疏水溶剂时都会出现分层现象。对于色谱分析来说，引发的问题主要两方面：样品溶液和流动相。样品溶液常遇到两种情况：高浓度供试品/盐溶液和添加疏水溶剂比如入二氯甲烷、甲苯等，这两种情况均会引起样品溶液分层，进而导致峰面积异常。当然，低温会加快这个过程。流动相方面主要是盐浓度过高，分层过程比较缓慢，进而出现保留时间的漂移。这种情况保留时间一般会向一个方向漂移。

二、工作站配置错误峰面积异常

某API有关物质检测，供试品峰高约3000左右，检验过程中电脑出现故障，于是更换另一台电脑重新检验。运行完毕后发现供试品峰高5000，出现了平头现象，其他杂质峰面积也都增加了。于是检查进样量，没有设置错误。这就有些奇怪，因为除了更换电脑之外，其他方面没有任何变动。难道液相系统配置有误？于是查找工作站配置，仅从工作站来看，跟其他工作站配置没有差别。再看仪器硬件，发现这台液相仪器定量环大，注射器为500ul。但更换的电脑工作站上配置的是100ul的注射器。实际注射器与工作站配置的注射器不一致。500ul注射器被当做100ul使用，注射器运动相同行程，因此导致进样量大，引起色谱峰过载。

同样问题也出现在离子色谱检测中。某API的钠离子检测过程中钠离子出峰很小，跟以前比差距太大。试验人员更换色谱柱、抑制器、流动相、重新配制样品，均没有改善。咨询工程师也没有任何解决措施，只能等待工程师上门维修。在此期间，实验人员仔细查看数据发现虽然峰面积小，但是精密度较好。这就说明仪器能够准确定量，可能某个参数设置不合适。影响进样量的主要是进样体积的设置，经检查没有问题。于是逐一核对工作站上的仪器配置，发现工作站上注射器为1000ul的，而实际仪器上为250ul。正是因为这种配置错误导致进样量偏小。