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蛋白浓度测定的各种方法及比较

嘉峪检测网        2016-03-23 09:03

不同测量方法样品中各物质兼容性

名称

特点

Bradford法(考马斯亮蓝法)

Lowry法(Folin-酚试剂法)

BCA法(二喹啉甲酸法)

检测灵敏度

检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到0.5ug

25~250 μg/mL

检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到0.5ug

测量范围

50-1000ug/ml

25~250 μg/mL

50-2000ug/ml

干扰因素

1:不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,DTT的浓度可高达5mM。

2:略受高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%。

3:含去垢剂的样品推荐BCA蛋白浓度测定试剂盒

1:干扰物质多(如Tris缓冲剂、蔗糖、硫酸铵、巯基化物、酚类、柠檬酸等)

 

1:不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。

2:受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。:3:不适用BCA法时建议试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒

检测速度

快,显色3-5min即可读数

室温反应30min

37-60℃,30min

成本

低,适合大量样品检测。

低,适合大量样品检测,比色皿检测

稍高一些,酶标板法比较常用的一种方法

最大吸收峰

595 nm

500nm

562 nm

测量样品

总蛋白测量

总蛋白测量

茶多酚测量

总蛋白测量

总结

三种蛋白定量方法,各有优缺点。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,可根据具体情况选取。

 

标准曲线

 

产品编号

产品名称

规格

价格

KMS01

Bradford蛋白浓度测定试剂盒

50ml×2

56.00

BCA01

BCA蛋白定量试剂盒

50ml(250T)

150.00

BCA02

BCA蛋白定量试剂盒

1000ml(5000T)

280.00

FLF01

Folin-酚蛋白定量试剂盒

50ml

70.00

 

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来源:AnyTesting