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嘉峪检测网 2016-03-23 09:03
不同测量方法样品中各物质兼容性
名称 特点 |
Bradford法(考马斯亮蓝法) |
Lowry法(Folin-酚试剂法) |
BCA法(二喹啉甲酸法) |
检测灵敏度 |
检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到0.5ug |
25~250 μg/mL |
检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到0.5ug |
测量范围 |
50-1000ug/ml |
25~250 μg/mL |
50-2000ug/ml |
干扰因素 |
1:不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,DTT的浓度可高达5mM。 2:略受高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%。 3:含去垢剂的样品推荐BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
1:干扰物质多(如Tris缓冲剂、蔗糖、硫酸铵、巯基化物、酚类、柠檬酸等)
|
1:不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。 2:受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。:3:不适用BCA法时建议试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒 |
检测速度 |
快,显色3-5min即可读数 |
室温反应30min |
37-60℃,30min |
成本 |
低,适合大量样品检测。 |
低,适合大量样品检测,比色皿检测 |
稍高一些,酶标板法比较常用的一种方法 |
最大吸收峰 |
595 nm |
500nm |
562 nm |
测量样品 |
总蛋白测量 |
总蛋白测量 茶多酚测量 |
总蛋白测量 |
总结 |
三种蛋白定量方法,各有优缺点。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,可根据具体情况选取。 |
标准曲线
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
价格 |
KMS01 |
Bradford蛋白浓度测定试剂盒 |
50ml×2 |
56.00 |
BCA01 |
BCA蛋白定量试剂盒 |
50ml(250T) |
150.00 |
BCA02 |
BCA蛋白定量试剂盒 |
1000ml(5000T) |
280.00 |
FLF01 |
Folin-酚蛋白定量试剂盒 |
50ml |
70.00 |
来源:AnyTesting