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嘉峪检测网 2021-10-20 23:57
溶液颜色检查法是原料药、溶液剂、注射剂等药品的常规检查项目。
关于溶液颜色检查法，各国药典均有收载，但具体方法还是有很大差异的，在此提醒大家，各家药典中溶液颜色的标准可不能随意套用哦。
今天小编总结了一下中国药典、美国药典、欧洲药典中溶液颜色检查法的差异，并列出相关法规依据，方便大家参考引用。
综述
中国药典的溶液颜色检查法有三个方法，美国药典有两个方法，欧洲药典只有目视比色法，分别在下表列出。
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药典 |
依据 |
方法 |
|
中国药典 |
通则0901 溶液颜色检查法 |
第一法：目视比色法 第二法：紫外-可见分光光度法 第三法：色差计法 |
|
美国药典 |
General Chapter <631>COLOR AND ACHROMICITY General Chapter <855>NEPHELOMETRY, tURBIDIMETRY, AND VISUAL COMPARISON |
目视比色法 |
|
General Chapter <1061>COLOR-INSTRUMENTAL MEASUREMENT |
色差计法 |
|
|
欧洲药典 |
2.2.2 DEGREE OF COLORATION OF LIQUIDS |
第一法和第二法均为目视比色法 |
相信大家对紫外分光光度法测定吸光度的方法都比较了解，而色差计法应用较少，所以本文重点比较三家药典中的目视比色法。
目视比色法的差异
各药典的比较内容列于下表，可以看出，中国药典的比色液是与美国药典、欧洲药典不同的，美国药典与欧洲药典配制溶液的种类虽然相同，但是配制过程还是有差异的。
而且，三家药典在色调和色号上也都有很大不同。中国药典的色号越大，颜色越深；欧洲药典的色号越大，颜色越浅；美国药典各色号则不按照深浅，没有规律。
大家在参考药典质量标准，以及申报不同国家药品注册时，一定要仔细确认、认真研读。
|
|
中国药典 |
美国药典 |
欧洲药典 |
|
实验装置 |
25ml纳氏比色管 |
二者相同 |
第一法：外径12mm；第二法：内径15~25mm。 |
|
取样量 |
供试品溶液和比色液各10ml |
二者用量相同，温度相同 |
第一法：各2ml；第二法：液面高度40mm。 |
|
检查方法 |
白色背景，自上而下透视或平视 |
白色背景，自上而下透视 |
第一法：白色背景，平视；第二法：白色背景，自上而下透视 |
|
比色溶液配制 |
重铬酸钾液（黄色）、硫酸铜液（蓝色）、氯化钴液（红色） |
三氯化铁液（黄色）、硫酸铜液（蓝色）、氯化钴液（红色） |
三氯化铁液（黄色）、硫酸铜液（蓝色）、氯化钴液（红色） |
|
色调 |
六个（绿黄色、黄绿色、黄色、橙黄色、橙红色、棕红色） |
无 |
五个（棕色B、棕黄色BY、黄色Y、黄绿色GY、红色R） |
|
色号 |
每个色调各11个（0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10） |
20个（A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T） |
B1~B9、BY1~BY7、Y1~Y7、GY1~GY7、R1~R7 |
|
备注 |
无色：溶液颜色与水或所用溶剂相同。 几乎无色：溶液颜色不深于相应色调0.5号比色液。 争议按第三法测定结果判定 |
争议按仪器法测定结果判定 |
无色：溶液颜色与水或所用溶剂相同；或不深于B9号比色液。 采用第一法时，比色液可密封、避光贮存于外径为12mm的无色透明中性玻璃试管中；采用第二法时，比色液需用母液临用新制
|
比色液配制
比色液的配制是这部分的重点，但是三家药典中所用的试剂、稀释液、配制方法均有不同，中国药典和欧洲药典的具体配制过程均列于上述依据中，但美国药典比色液的配制则需要结合《Reagents, Indicators and Solution》的colorimetric solutions（CS）部分。各药典的具体配制过程见下文。
1 中国药典的比色液
请参考通则0901，此处不赘述。
2 美国药典的比色液
混合溶剂：盐酸-水（25：975）。
氯化钴比色液：称取氯化钴（CoCl2·6H2O）约65g，溶解于1000ml混合溶剂中，量取该溶液5ml置于250ml碘瓶中，加入过氧化氢试液5ml和氢氧化钠溶液（1→5）15ml，煮沸10min，放冷，加入碘化钾2g和稀硫酸（1→4）20ml。溶解后，用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，加入淀粉试液3ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml 0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于23.79mg的CoCl2·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含59.5mg的CoCl2·6H2O。
硫酸铜比色液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）约65g，溶解于1000ml混合溶剂中，量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中，加入水40ml、醋酸4ml、碘化钾3g和盐酸5ml。用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，并加入淀粉试液3ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含62.4mg的CuSO4·5H2O。
三氯化铁比色液：称取三氯化铁（FeCl3·6H2O）约55g，溶解于1000ml混合溶剂中，量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中，加入水15ml、碘化钾3g和盐酸5ml，混匀，放置15min，加入水100ml，用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，加入淀粉试液3ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于27.03mg的FeCl3·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含45.0mg的FeCl3·6H2O。
美国药典中标准比色液的配制比例
|
色号 |
氯化钴比色液 |
三氯化铁比色液 |
硫酸铜比色液 |
水 |
|
A |
0.1 |
0.4 |
0.1 |
4.4 |
|
B |
0.3 |
0.9 |
0.3 |
3.5 |
|
C |
0.1 |
0.6 |
0.1 |
4.2 |
|
D |
0.3 |
0.6 |
0.4 |
3.7 |
|
E |
0.4 |
1.2 |
0.3 |
3.1 |
|
F |
0.3 |
1.2 |
0 |
3.5 |
|
G |
0.5 |
1.2 |
0.2 |
3.1 |
|
H |
0.2 |
1.5 |
0 |
3.3 |
|
I |
0.4 |
2.2 |
0.1 |
2.3 |
|
J |
0.4 |
3.5 |
0.1 |
1.0 |
|
K |
0.5 |
4.5 |
0 |
0 |
|
L |
0.8 |
3.8 |
0.1 |
0.3 |
|
M |
0.1 |
2.0 |
0.1 |
2.8 |
|
N |
0 |
4.9 |
0.1 |
0 |
|
O |
0.1 |
4.8 |
0.1 |
0 |
|
P |
0.2 |
0.4 |
0.1 |
4.3 |
|
Q |
0.2 |
0.3 |
0.1 |
4.4 |
|
R |
0.3 |
0.4 |
0.2 |
4.1 |
|
S |
0.2 |
0.1 |
0 |
4.7 |
|
T |
0.5 |
0.5 |
0.4 |
3.6 |
3 欧洲药典的比色液
混合溶剂：盐酸-水（25：975）。
三氯化铁比色液：称取三氯化铁（FeCl3·6H2O）约46g，溶解于900ml混合溶液中，并用混合溶剂稀释至1000ml，量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中，加入水15ml、碘化钾4g和盐酸5ml，混匀，暗处放置15min，加入水100ml，用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于27.03mg的FeCl3·6H2O。用盐酸和水的混合溶液调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含45.0mg的FeCl3·6H2O。
氯化钴比色液：称取氯化钴（CoCl2·6H2O）约60g，溶解于900ml混合溶液中，并用混合溶剂稀释至1000ml，量取该溶液5ml置于250ml碘瓶中，加入稀过氧化氢溶液5ml和300g/L氢氧化钠溶液10ml，煮沸10min，放冷，加入碘化钾2g和稀硫酸60ml。溶解后，用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于23.79mg的CoCl2·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含59.5mg的CoCl2·6H2O。
硫酸铜比色液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）约63g，溶解于900ml混合溶液中，并用混合溶剂稀释至1000ml，量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中，加入水50ml、稀醋酸溶液12ml、碘化钾3g。用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘，在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂，并将滴定结果用空白实验校正。每1ml 0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积，使每1ml比色液中含62.4mg的CuSO4·5H2O。
欧洲药典中五个色调溶液的配制比例
|
五个色调溶液 |
体积（ml） |
|||
|
三氯化铁比色液 |
氯化钴比色液 |
硫酸铜比色液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
B（棕色） |
3.0 |
3.0 |
2.4 |
1.6 |
|
BY（棕黄色） |
2.4 |
1.0 |
0.4 |
6.2 |
|
Y（黄色） |
2.4 |
0.6 |
0 |
7.0 |
|
GY（黄绿色） |
9.6 |
0.2 |
0.2 |
0 |
|
R（红色） |
1.0 |
2.0 |
0 |
7.0 |
棕色比色液B系列的配制比例
|
棕色标准比色液 |
体积（ml） |
|
|
色调B溶液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
B1 |
75.0 |
25.0 |
|
B2 |
50.0 |
50.0 |
|
B3 |
37.5 |
62.5 |
|
B4 |
25.0 |
75.0 |
|
B5 |
12.5 |
87.5 |
|
B6 |
5.0 |
95.0 |
|
B7 |
2.5 |
97.5 |
|
B8 |
1.5 |
98.5 |
|
B9 |
1.0 |
99.0 |
棕黄色比色液BY系列的配制比例
|
棕黄色标准比色液 |
体积（ml） |
|
|
色调BY溶液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
BY1 |
100.0 |
0 |
|
BY2 |
75.0 |
25.0 |
|
BY3 |
50.0 |
50.0 |
|
BY4 |
25.0 |
75.0 |
|
BY5 |
12.5 |
57.5 |
|
BY6 |
5.0 |
95.0 |
|
BY7 |
2.5 |
97.5 |
黄色比色液Y系列的配制比例
|
棕色标准比色液 |
体积（ml） |
|
|
色调Y溶液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
Y1 |
100.0 |
0 |
|
Y2 |
75.0 |
25.0 |
|
Y3 |
50.0 |
50.0 |
|
Y4 |
25.0 |
75.0 |
|
Y5 |
12.5 |
57.5 |
|
Y6 |
5.0 |
95.0 |
|
Y7 |
2.5 |
97.5 |
黄绿色比色液GY系列的配制比例
|
棕色标准比色液 |
体积（ml） |
|
|
色调GY溶液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
GY1 |
25.0 |
75.0 |
|
GY2 |
15.0 |
85.0 |
|
GY3 |
8.5 |
91.5 |
|
GY4 |
5.0 |
95.0 |
|
GY5 |
3.0 |
97.0 |
|
GY6 |
1.5 |
98.5 |
|
GY7 |
0.75 |
99.25 |
黄色比色液R系列的配制比例
|
棕色标准比色液 |
体积（ml） |
|
|
色调R溶液 |
10g/L盐酸溶液 |
|
|
R1 |
100.0 |
0 |
|
R2 |
75.0 |
25.0 |
|
R3 |
50.0 |
50.0 |
|
R4 |
37.5 |
62.5 |
|
R5 |
25.0 |
75.0 |
|
R6 |
12.5 |
87.5 |
|
R7 |
5.0 |
95.0 |
总结
想必大家已经看出，三家药典的差异性还是很大的，所以在查阅各国药品质量标准时，绝对不能随意套用溶液颜色的限度标准。
检查过程中，还要注意以下几点：
1、 所用比色管应洁净、干燥，洗涤时不能用硬物磨刷，应用铬酸洗液浸泡后用纯化水冲净，避免表面粗糙或粘有杂物。
2、参考各国标准时，需要注意比色液、色调、色号的选择，以及检查时视线的方向。
3、检查时光线应明亮，光强度应能保证使各相邻色号的标准液清晰分辨。
4、争议结果的处理：中美药典都推荐以色差计法的检测结果为准，实验单位配备色差计也是一个发展方向呢。
现在是不是能够拿捏到各国药典的不同之处，从而灵活运用了呢？
若有不当之处，敬请指正。大家还对两国药典哪个部分的异同感兴趣，欢迎留言，跟着小编，一起学药典。
参考文献
1、中国药品检验标准操作规范（2019年版）
2、中国药典（2020年版）
3、美国药典（43版）
4、欧洲药典（10.0版）
来源：Internet
