近日，烟台正海生物科技股份有限公司的“活性生物骨”获批上市，嘉峪检测网与您一起了解一下活性生物骨在临床前研发阶段做了哪些实验。

一、活性生物骨的产品结构及组成

活性生物骨是由异种骨经一系列处理后制成的骨支架材料(主要成分为羟基磷灰石和胶原蛋白),与具有胶原特异结合能力的重组人骨形态发生蛋白(以下简称rhBMP-2)结合而成的骨修复材料。产品经辐照灭菌，灭菌有效期2年。

二、活性生物骨的适用范围

用于填充由于创伤或手术造成的、不影响骨结构稳定性的骨缺损。

三、活性生物骨的作用机理

活性生物骨是由异种骨经一系列处理后制成的骨支架材料，与具有胶原特异结合能力的重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)结合而成的骨修复材料。其中，骨支架材料保持了骨的天然结构，具有适宜的孔径和孔隙率，利用骨支架材料的疏松网状占位结构，可以填充骨缺损，并支持局部组织的细胞和血管向内爬行，在其内存活并逐步将其吸收和取代;rhBMP-2在骨愈合过程中，可以募集间充质细胞，并诱导其向成骨细胞或成软骨细胞方向分化，同时协同其他调节因子参与骨组织形成。活性生物骨通过骨支架材料与rhBMP-2的协同作用，实现对骨缺损的填充和修复。

四、活性生物骨的产品技术要求

（1）rhBMP -2的技术要求研究项目如下：

1.蛋白质含量

2.比活性

3.纯度(电泳法)

4.纯度(高效液相色谱法)

5.分子量

6.外源性DNA残留量

7.宿主菌蛋白残留量

8.细菌内毒素

9.等电点

10.紫外光谱扫描

11.肽图

12.N-末端氨基酸序列

13.水分

14.微生物限度

15.IPTG残留

16.DTT残留

（2）活性生物骨的技术要求研究项目如下：

17.外观

18.规格

19.抗压强度(块型及圆柱型)

20.模拟体液中形变(块型及圆柱型)

21.显气孔率(块型及圆柱型)

22.pH值

23.重金属总量

24.砷、镉、汞、铅的含量

25.钙磷原子比

26.无机物含量

27.无机物组分含量

28.含水量

29.蛋白总量

30.羟脯氨酸含量

31.rhBMP-2含量

32.蔗糖含量

33.L-精氨酸盐酸盐含量

34.无菌

35.细菌内毒素

36.生物学活性

37.脱细胞

五、活性生物骨的产品性能研究

产品性能评价包括:蛋白质含量、比活性、纯度、分子量、外源性DNA残留量、宿主菌蛋白残留量、等电点、肽图、N-末端氨基酸序列、紫外光谱、DTT、IPTG、外观、规格、抗压强度、模拟体液中形变、显气孔率、pH值、重金属总量、砷镉汞铅的含量、钙磷原子比、无机物含量、无机物组分含量、含水量、蛋白总量、羟脯氨酸含量、rhBMP-2含量、蔗糖含量、L-精氨酸盐酸盐含量、无菌、细菌内毒素、生物学活性、脱细胞、微观形貌、孑径、兽药残留量、孔隙截距、rhBMP-2与胶原亲和力、产品对间充质干细胞和骨祖细胞的诱导分化、Triton残留、可溶性磷含量、氯化物含量、菌种检定等。

六、活性生物骨的生物相容性研究

该产品为植入器械，与组织/骨持久接触(大于30天)。正海生物依据GB/T16886系列标准进行了生物相容性评价，选择开展的生物学试验项目包括:热原、细胞毒性、刺激、致敏、急性全身毒性、慢性全身毒性、鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验、体外小鼠淋巴瘤细胞突变试验、染色体畸变试验、植入与降解等，生物相容性风险可接受。

七、活性生物骨的灭菌研究

该产品采用辐射灭菌，无菌状态提供。正海生物提供了灭菌确认报告，证明无菌保证水平可达10^-6。

八、活性生物骨的产品有效期和包装

该产品货架有效期为两年。正海生物提供了货架有效期验证报告，验证方式为加速老化和实时老化验证，包括产品稳定性、包装完整性和运输模拟验证资料。

九、活性生物骨的动物研究

正海生物开展了系列动物试验研究，包括大鼠肌袋植入活性生物骨药代动力学试验、大鼠肌袋植入活性生物骨组织分布试验、活性生物骨小鼠急性全身毒性试验、大鼠肌袋植入活性生物骨6个月慢性全身毒性试验、活性生物骨有效剂量动物试验、活性生物骨修复免桡骨缺损动物实验研究、Beagle犬缺损桡骨植入活性生物骨6个月有效性及安全性试验等。