简介

磺胺类化合物被广泛运用于畜牧业生产中，作为有效的抗生素，它在治疗细菌和原生动物感染领域占居重要地位。为了提高动物的抗病 性，其也被广泛应用于动物饲养过程，从而造成了牛奶中抗生素的残 留，并危害人类健康。近几年来，为进一步提高工作效率，检测者越 来越注重多残留的同时检测。 在欧盟，2377/90/EEC中规定牛奶中总磺胺类药物的最大残留量为100μg/kg。 现今测定牛奶中磺胺残留的方法有微生物检验法和理化检验法。 该方法可以同时检测Sulfamethoxazole（磺胺甲恶唑），Sulfadimethoxine （磺胺二甲氧嘧啶），Sulfamonomethoxine（磺胺间甲氧嘧啶）， Sulfaclozine（磺胺氯吡嗪），Sulfaquinoxaline（磺胺喹噁啉）和Suldimidine （磺胺嘧啶）等六种磺胺类化合物。通过比较，Oasis MCX对于六种磺 胺类药物的回收率较高，该方法可以同时检测牛奶中这六种磺胺类化 合物。

LC条件

系统： ACQUITY UPLC ® I-Class/ Xevo TQ-S 液质联用系统 色谱柱： ACQUITY UPLC ® BEH C18, 1.7 μm, 2.1×50 mm P/N 186002350 流动相A1: 乙腈 流动相B1: 水+0.1% FA 样品温度： 10 ℃ 柱温： 40 ℃

样品制备：

牛奶样品前处理（使用前处理SPE柱）：取5 mL牛奶样品，加入100μL六 种混合标准品溶液（500 ng/mL），加标后牛奶样品经过沉淀蛋白离心 后取上清液，分别上样到四种SPE小柱上（Oasis MCX/MAX/WAX/WCX）。 1. 在20位负压装置上放置4支Oasis小柱，分别取3 mL甲醇和3 mL水活 化、平衡固相萃取柱。 2. 上样：取上样溶液分别上样到四种小柱上。控制样品流速使液滴 不成线，以保证样品与填料间有足够的相互作用。收集上样液， 并进样分析。 3. 清洗：MCX和WAX填料以3 mL2% FA水溶液清洗；MAX和WCX填料以3 mL5%氨水水溶液清洗。收集清洗液，并进样分析。 4. 洗脱1：分别以3 mL甲醇进行第一步洗脱溶液。收集洗脱液1，并进 样分析。 5. 洗脱2：对于MCX和WAX第二步洗脱，分别以3 mL5%氨水甲醇为洗 脱液; 对于WCX和MAX, 分别以3 mL2%甲酸甲醇为洗脱液，收集这一 步洗脱液，并进样分析。

结果与讨论

待测物质分别为：磺胺甲恶唑、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯吡嗪、磺胺喹噁 啉、磺胺嘧啶。通过比较， Oasis MCX对于六种磺胺类药物的回收率较高，故选择Oasis MCX进行 方法优化。六种化合物的回收率分别是：磺胺甲恶唑 83.3%、磺胺二甲氧嘧啶 86.5%、磺胺间甲 氧嘧啶86.1%、磺胺氯吡嗪85.4%、磺胺喹噁啉87.1%、磺胺嘧啶90.7%。六种化合物定量、定性 离子图谱如下: