作者：付文竹

单位：广东省药品监督管理局审评认证中心 （广东 广州 510080）

内容提要：血药浓度测定类试剂盒是指通过对血液或其他体液中药物浓度的体外定量检测，进而指导临床制定个体化给药方案，进行剂量管理，提高疗效和减少不良反应，达到临床安全、有效、合理用药的目的。文章主要针对此类产品在注册申报过程中的分析性能评估、参考值研究、临床研究方法进行讨论。

关 键 词：血药浓度 分析性能 参考值研究 临床研究方法

      血药浓度测定类试剂盒是指通过对血液或其他体液中药物浓度的体外定量检测，进而指导临床制定个体化给药方案，进行剂量管理，提高疗效和减少不良反应，达到临床安全、有效、合理用药的目的。目前在美、英、加拿大等医疗先进国家，血药浓度检测已成为一项日常医疗工作。而我国目前医疗水平相对滞后，受检测方法的限制，血药浓度监测项目开展较少。目前测定药物浓度的主要分析方法为光谱法、色谱法和免疫化学法。检测血药浓度是反映其用药有效性最准确和最实用的方法。

      本文主要针对血药浓度测定类商品化试剂盒产品，在注册申报过程中遇到的一些问题进行阐述。以下主要从分析性能评估、参考值研究、临床研究方法进行讨论。

1.分析性能

1.1最低检出限/分析灵敏度

      大部分药物检测的产品无国行标，又无相关推荐最低检出限的指导原则，企业可根据相关药物具体代谢情况自行确定合理的最低检出限。

1.2特异性研究

      交叉反应：应列出所有可能产生交叉反应的药物/化合物及其最低检出浓度，所有经验证无交叉反应性的药物/化合物及其验证的最高浓度。

干扰物质：介绍体内吸收的常用药物或物质，内源性物质或生理条件变化对检测的干扰验证情况。

1.3准确性

      因大部分目标检测物质有国家标准品，如有国家标准品、参考品，应当使用国家标准品、参考品进行注册检验，并符合相关要求。如无国家标准品，可使用有证参考物质（如国际参考品，国家约定参考品）或企业参考品进行偏差比较。

1.4精密度

      对于药物测定类试剂，临床上往往具有监测的功能，精密度差会影响临床监测，造成总随机变异（个体内生物学变异和分析变异）增加，因此精密度是一个重要考核指标。

2.参考值研究

       近年来，血药浓度监测及个体化给药治疗越来越受到各个国家广泛的重视。中国药理学会治疗药物监测研究专业委员会近些年来也陆续发布了符合中国国情的某些药物的个体化用药指南。

      某个药物的参考区间根据其发生疗效及产生毒副作用时的血药浓度来确定。当某个目标药物的血药浓度低于参考区间的低限时，药物可能无法产生相应的治疗效果。当超过参考区间的高限时，药物可能会发生较大的毒副作用。根据目前的参考值研究方法，因正常人群无法建立此参考值，也不符合医学伦理学要求，药物代谢因个体的差异而有不同代谢水平，属药代动力学范畴，一般为药物研发阶段研究范畴企业可参照相关指南及文献提供相应的参考区间，但需提供临床指标来验证。

3.临床试验

3.1管理类别

      根据《体外诊断试剂分类子目录》，除麻、精、毒医疗用毒性药品检测的试剂为三类，且非用于肿瘤的诊断、辅助诊断、治疗过程的监测，或者用于遗传性疾病的诊断、辅助诊断等，其他用于药物及药物代谢物检测的试剂均为二类试剂，应按二类产品申报管理。而根据《免于进行临床试验的体外诊断试剂目录》，列入可免于临床试验的药物检测试剂仅为23个，除此之外，应进行临床试验。

3.2研究方法

3.2.1有同类产品的临床试验

      采用试验用体外诊断试剂与已上市产品针对临床样本进行比较研究试验，证明试验用体外诊断试剂与已上市产品等效。

      对于中国境内已批准上市，应选择中国境内已批准上市、临床普遍认为质量较好的方法学类似、参考值相近的同类试剂作为对比试剂。通过比对试验，证明考核试剂与已上市产品等效或优于已上市产品。同时建议选择检测范围内一定数量（30~50例）样本与参考方法（如气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等）进行临床比对，考察考核试剂临床检测结果的灵敏度和特异性[1,2]。

      对于中国境内无同类产品，而检测物非新标的物、非新方法，境外有同类批准上市的产品，可选择境外已取得FDA注册证或CE认证的产品作为比对试剂，同时建议选择检测范围内一定数量（30~50例）样本与参考方法（如气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等）进行比对试验[1,2]。样本例数参照二类体外诊断试剂临床试验要求，不低于200例，适当增加，并符合统计学要求。在与境外产品做比对时，因境外注册的法规与国内的差异性，造成产品的标准无法统一，因此在审评时也无绝对的统一标准，应根据具体产品的风险及特点具体分析，尽量避免形式主义，而应充分考虑产品与比对产品的差异性，针对性的开展临床试验。

3.2.2新产品的临床试验

      而境内境外均无同品种上市产品，即为全球首创，视为新产品。对于新研制体外诊断试剂而言，选择适当的受试者，采用试验用体外诊断试剂与诊断该疾病的“金标准”进行盲法同步比较，总样本量为1000例。如使用考核试剂与相应参考方法（如气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等）进行临床比对。应对参考方法的方法建立及方法学考察结果进行详细描述。如气相色谱-质谱法（GC-MS）应详细介绍样本的衍生化方法、色谱条件、质谱条件、检测离子并提供典型色谱图与质谱图，并说明对确定的检测条件进行方法学考察的具体结果，如方法专属性、灵敏度、线性、精密度、回收率等，可参考药物滥用检测试剂技术审查指导原则相关要求[2]。

3.3病例选择及样本要求

      血药浓度监测工作最重要的是结合临床对检测结果解释。选择服用检测药物患者的样本，对应临床背景要求，应补充低值、临界值、高值患者（未添加药物的）的临床指标或与目前参考方法比对的结果分析，有些药物高值样本较难或者，可酌情减少），并应给出临床指标（如临床医生的用药方案）[3]。而按照新产品申报的采用与金标准比对的受试者应按照体外诊断试剂临床试验技术指导原则进行要求。

3.4统计学分析

      说明数据预处理、对无效结果的处理和排除情况，对考核试剂与对比试剂的试验结果进行统计。与参考方法比对的结果应单独统计，并依据结果对检测结果浓度范围进行说明。应对纳入临床试验的病例类型进行总结归纳，说明交叉反应及干扰病例的情况。具体统计学方法可参考EP9-A3，在此不做赘述。

4.讨论

      血药浓度测定，必须正确认识其临床意义和价值。药物剂量与药效之间的关系在个体之间差别较大，一些因素影响如个体差异、剂型及给药途径、疾病情况、药物相互作用及联合用药等都会影响血药浓度、药效及临床判断[4]。而产品质量的关键是检测的准确性及精密度，与已上市产品比对的一致性或与参考方法比对的一致性，参考值往往是直接引用相关指南及文献提供相应的参考区间，但各类试剂之间性能存在差异，进行临床比对时应结合选择目前比较准确地参考方法及临床指标进行比对，进而验证试剂的准确性、精密度及参考区间的合理性，保证新上市试剂具备良好性能。而此类血药浓度测定类试剂盒的临床预期用途仅为尽可能准确地检测出血液中药物的浓度值，从而为临床医生指导用药提供依据。具体如何用药，应结合其他临床信息来进行剂量管理，提高疗效和减少不良反应。由临床医生根据临床实际情况而定。